1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
课题意义：
乳腺炎，最初被定义为由入侵细菌引起的乳腺的炎症反应[1]，是现代奶牛饲养中最常见和最昂贵的生产疾病，因为它能够降低产奶量和质量，奶牛的乳房炎是各种因素共同作用的结果，最普遍的因素是病原体的感染。尽管数十年的深入研究和预防措施的实施，乳腺炎仍然是一个棘手的疾病[2]。从微观角度来看，乳腺组织损伤实际是乳腺细胞损伤和死亡。在哺乳期，奶牛乳腺上皮细胞容易发生极端代谢应激，这很容易引发乳腺炎。奶牛乳腺上皮细胞是参与防御乳腺入侵的第一道防线，并在感染的早期阶段发挥重要作用[3]。因此，维持奶牛乳腺上皮细胞的正常稳态和降低细胞应激对于降低乳腺炎的发病率至关重要。
chemerin也称为视黄酸受体反应蛋白2（rarres2），是2007年新确认的脂肪因子，在白色脂肪组织和肝脏中高度表达。目前已证实其在脂肪脂解与分化、糖代谢、生殖调控、肿瘤等方面都发挥一定的调控作用[4]。而在免疫功能方面，许多实验证据支持chemerin/ cmklr1的促炎作用，但也有研究表明该信号传导途径具有抗炎功能[5]，这主要取决于chemerin的酶切位点。已有研究证实chemerin在奶牛乳腺中表达，并上调与脂肪酸合成，葡萄糖摄取和酪蛋白合成相关的基因[6]，但关于chemerin对奶牛乳腺炎的研究目前比较少，本文拟通过chemerin处理奶牛乳腺上皮细胞以观察炎症反应和随后的细胞凋亡，进一步完善乳腺疾病的发病机制奠定基础。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标
体外成功培养并鉴定奶牛乳腺上皮细胞，明确脂肪因子chemerin奶牛乳腺上皮细胞炎症及凋亡的作用。
研究内容
3. 研究的方法与方案
研究方法：
本项目拟采用western blot分析炎症和凋亡关键基因与蛋白的表达；应用免疫荧光技术检测细胞内ros积累情况；同时，利用流式细胞术研究细胞凋亡率。
技术路线：见附件
4. 研究创新点
乳腺炎的发生机制复杂，而Chemerin作为炎性因子，已确认在多种炎性生理病理性疾病中发挥调控作用，但在奶牛乳腺炎上，特别是奶牛乳腺上皮细胞目前尚未见报道。
本研究拟以奶牛乳腺上皮细胞为细胞模型，在分子水平上利用多种方法分析Chemerin对奶牛乳腺上皮细胞炎症及凋亡的影响，能为奶牛乳腺炎提供新的防控靶标，具有一定的特色和创新。5. 研究计划与进展
研究计划：
2018.09-2018.10 查阅相关资料进行前期准备；
2018.10-2018.11 奶牛乳腺上皮细胞的体外培养及冻存；
