1. 研究目的与意义
本研究拟采用来源于南极假丝酵母的脂肪酶B基因在毕赤酵母KM71H中诱导表达。
目的:通过采取不同的毕赤酵母表达载体(pPICZaA和pGAPZaA)进行重组表达，对比不同启动子对该酶表达量、脂肪酶活力以及酶学性质的影响。
意义:为进一步提高南极假丝酵母脂肪酶B的酶活和生物催化性能打下较好的基础。2. 国内外研究现状分析
南极假丝酵母脂肪酶B是一种优良的脂肪酶，它对水溶性、非水溶性物质都有很强的催化活性，在有机合成、手性化合物拆分、医药中间体等领域得到广泛应用。研究概况：目前，CALB已成功应用于脂类合成和手性物质拆分。
实例：用CALB催化合成脂肪酸糖酯；用固定化CALB催化合成香茅醇的月桂酸酯等。3. 研究的基本内容与计划
拟采用含南极假丝酵母脂肪酶b基因的重组质粒直接在毕赤酵母中表达，需要查阅并总结毕赤酵母表达系统的使用方法，脂肪酶酶活的测定方法。
实验计划：
3月3月中旬 克隆南极假丝酵母脂肪酶b基因，构建毕赤酵母表达载体。
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4. 研究创新点
启动子是基因工程表达载体的一个重要元件，它不仅决定了基因的表达水平，也决定了基因表达的时空顺序。
本实验的特色就是选择不同启动子的质粒构建重组毕赤酵母表达载体并对比，从而找到适合该脂肪酶表达的启动子。
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