1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
双酚a(bisphenol a,bpa)是一种化学物质,它的化学名称为2,2-二(4-羟基苯基)丙烷,是生产聚碳酸酯以及环氧树脂等塑料制品的重要中间体物质,而且这些原材料广泛被用于生产日常所需的各类生活用品,如食物和饮料的容器,婴儿奶瓶,发票及牙科填充材料等[1]。
环氧树脂具有防水作用,因此为了防止食物和水直接接触金属,环氧树脂还被用作与食物喝饮料相关容器的内涂层[2]。
近年来,现代工业迅速发展,塑料制品的用量也随着人们生活水平的提高约来月多,因此,bpa的需求量日益曾多,而bpa 用于最多的塑料制品是聚碳酸酯,2013年,大约需要508万吨的bpa来合成聚碳酸酯,其次是141万吨的bpa 来合成环氧树脂[3]。
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2. 研究的基本内容和问题
3. 研究方案 3.1 研究目标本研究中将采用鸡胚模型,通过人工孵化、iof技术、石蜡切片、he染色、实时定量pcr、免疫荧光染色等技术手段,针对“ bpa对鸡胚卵巢发育的影响”这个科学问题,探究bpa在鸡胚减数分裂过程的影响,从dna甲基化等方面深入分析并探索bpa影响鸡胚卵母细胞减数分裂的原因。
本研究将拓展我们对bpa在鸡胚卵巢发育方面的认识,通过研究bpa对鸡胚卵母细胞的减数分裂,为探讨鸡胚卵母细胞减数分裂以及提高家禽的繁殖性能提供理论基础。
3.2 研究内容(1)基本表型分析:bpa对鸡胚卵巢发育的影响。
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3. 研究的方法与方案
拟采用的研究方法与技术路线、实验方案及可行性分析4.1技术路线
4.2研究方法4.2.1实验动物及样品采集 法国萨索鸡种蛋在条件为温度为37.8℃,相对湿度为55-65的环境下孵化到所需胚龄。
e0天孵化开始分别钝头蛋清注射0.05mg/胚的bpa,对照组注射pbs,此后每隔3天注射一次bpa。
鸡胚在孵化到e15.5、e17.5、e18.5采集左侧卵巢,一部分卵巢组织用于qrt-pcr检测,并将组织样立即投放到液氮中,于-80℃储存。
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4. 研究创新点
5.本项目的特色与创新之处(1)研究课题具有前沿性和创新性:bpa广泛分布于自然界,是常见的环境雌激素类似物,对人类和畜禽的健康危害较大。
本研究中将针对“ bpa对鸡胚卵巢发育的影响”这个科学问题,探究bpa在鸡胚减数分裂过程的影响,从dna甲基化等方面深入分析并探索bpa影响鸡胚卵母细胞减数分裂的原因。
本研究将拓展我们对bpa在鸡胚卵巢发育方面的认识,通过研究bpa对鸡胚卵母细胞的减数分裂,为探讨鸡胚卵母细胞减数分裂以及提高家禽的繁殖性能提供理论基础。
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5. 研究计划与进展
6. 研究计划及预期进展
6.1项目研究计划(1)2019.11-2019.12 相关研究文献的搜集与阅读整理。
(2)2019.12-2020.4 利用石蜡切片和he染色技术、免疫荧光染色、rt-pcr技术探索bpa对鸡胚卵巢发育影响。
(3)2020.4-2020.5 统计总结研究结果,整理数据并撰写论文。
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