1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
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研究意义
表观遗传学是研究由非序列改变而引起基因表达和功能水平变化的一门学科，涉及dna、rna和蛋白质的多种化学修饰形式。作为rna修饰中最丰富的形式之一，n6-腺嘌呤甲基化（m6a）广泛分布于mrna中[1]。m6a参与调控动物机体内的多种生命活动，对维持机体正常的生理功能和调控疾病的发生发展具有关键性的作用[2]。研究表明，精子的发生、肿瘤的发展、生物钟的调控，乃至肥胖症和糖尿病的病理变化等过程中均涉及m6a的修饰调控[1]。
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（1）研究目标
本试验主要研究了饲粮中添加甜菜碱对湖羊睾丸细胞中m6a甲基化水平的影响，从而探究甜菜碱调控m6a甲基化水平，进而参与调控精子发生等动物生殖的相关生理活动，旨在为后续的试验提供理论依据。
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（1）研究方法
本试验选用体重在32至37kg的雄性湖羊作为试验对象，将其随机分为四组，再将每组随机分为两栏，每栏10只羊。对照组湖羊饲喂基础育肥日粮，实验组湖羊在此基础上分别添加1g，2g，3g/只/d的甜菜碱。饲喂期结束后，根据各组的平均体重每组每栏各选取5只羊进行屠宰。然后采集睾丸样品在-80℃冷冻保存，利用荧光定量pcr技术检测m6a相关基因的mrna表达水平，利用western blot技术检测m6a相关酶的蛋白表达水平，并检测精子发生相关蛋白在不同甜菜碱饲喂组中的表达水平。最后，利用prism、spss等软件对以上数据进行分析汇总和差异显著性分析，确定m6a甲基化相关酶及精子发生相关基因的mrna和蛋白表达水平变化，为探究甜菜碱在肉羊产业中的应用及深入理解大动物精子发生的调控机制提供参考。
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作为畜牧生产中常用的添加剂，甜菜碱被认为可以有效地促进脂肪代谢，利于动物的生长，但是目前很少有研究探索甜菜碱作为甲基供体，对动物细胞内m6A甲基化水平的影响。本实验以湖羊为研究对象，探究了饲料中的甜菜碱水平通过m6A甲基化修饰对雄性湖羊精子发生的影响，这将为之后对湖羊生殖机能以及营养调控繁殖的分子机理提供一定的参考依据。
5. 研究计划与进展
（1）年度研究计划
本项目拟在一年内结题，并完成全部科研工作。
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