1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
肠出血性大肠杆菌（enterohemorrhagic e.coli， ehec）是一种食源性人畜共患肠道致病菌，可在7℃-50℃的温度环境中生长，其最佳的生长温度为37℃，一些ehec可在ph值达到4.4的酸性食品和最低水活度为0.95的食物中生长[1]。
ehec产志贺毒素，可致vero细胞死亡，可引起人和多种畜禽感染、发病，其临床症状通常表现为突然的腹痛、水样腹泻、血便、血尿，10%的ehec感染者可能会发展为溶血性尿毒综合征，病死率约为3%至5%，其中25%的溶血性尿毒综合征患者可出现神经系统并发症，大约50%的幸存者会患有慢性肾病后遗症[1]。
ehec自1982年在美国首次被发现起[2]，相继在英国、加拿大、日本、德国等国家暴发流行[3]；其血清型众多，典型代表是o157:h7和o104:h4，毒力极强，100个细菌即可致病。
2. 研究的基本内容和问题
肠出血性大肠杆菌病是严重危害人类健康的食源性人畜共患病，其致病率和致死率较高，该病分布广泛，一年四季均有发病，呈全球流行趋势，给人类的健康带来极大的威胁。
抗生素治疗曾是本病的有效治疗方案，但由于近年来抗生素的滥用和超量使用，细菌的耐药性显著提高，使得人们需要寻找新的抗菌制剂。
噬菌体因为其能裂解细菌的特性，受到医疗机构越来越多的关注，希望能将之开发成新兴的治疗方法，以治疗人和动物的细菌性感染。
3. 研究的方法与方案
研究方案（一）研究目标用毕赤酵母表达系统高效表达出有活性的肠出血性大肠杆菌噬菌体裂解酶。
（二）研究内容（1）裂解酶的表达1.酵母菌株的分离纯化接种gs115于5ml ypd液体培养基，30℃。
200rpm振荡过夜，涂布ypd平板，30℃培养48小时，用ynb基本培养基和含his的补充培养基作点钟分离纯化，挑选在补充培养基上生长而在基本培养基上不生长的单菌落，划ypd平板，4℃保存。
4. 研究创新点
噬菌体裂解酶是一种新兴的能够替代抗生素的抗菌制剂，可以解决抗生素滥用所带来的细菌耐药性问题。
不同于常用的大肠杆菌表达系统表达噬菌体裂解酶的方法，本研究使用了毕赤酵母表达系统表达噬菌体裂解酶，用此方法表达噬菌体裂解酶鲜有报道。
本研究采用多种方法测定噬菌体裂解酶的生物活性，可以相互比较印证。
5. 研究计划与进展
预期进展a）查阅资料、完善实验方法半个月b）毕赤酵母表达目的蛋白一个月c）裂解酶的生物活性测定半个月预期成果用毕赤酵母表达系统高效表达出有活性的肠出血性大肠杆菌噬菌体裂解酶。
并完善实验步骤，为日后的实验打下基础。
