两株基因2型牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1、 本课题的目的和意义牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus，bvdv）是危害世界养殖业的重要病原。

该病毒可感染牛、猪、山羊、绵羊等多种动物，引起呼吸道、消化道疾病，还能造成繁殖障碍和持续感染。

牛病毒性腹泻病在我国有流行趋势并且会引起严重的经济损失，而目前国内缺乏商品化的bvdv疫苗，又由于该病毒与瘟病毒属其他病毒均有交叉反应，故针对该病的防控、鉴别诊断和治疗均存在一定的难度。

2. 研究的基本内容和问题

1、 研究的目标(1)通过图书馆和网络以及导师给予的资料，主要是前人的研究论文（包括中文和英文），大致了解牛的病毒性腹泻病的主要病症以及其致病机理；了解bvdv毒株的特性及其进化分析。

(2)利用细胞培养技术分离病毒并进行扩增，通过差速离心方法大量获取该病毒以供后续研究。

再通过查阅以往文献，了解该病毒的特性以及对细胞生长的影响。

3. 研究的方法与方案

1、 研究方法先进行大量的理论学习，知道我们将要完成的课题的意义，再在导师指导下进行实践操作。

最后再在得到分析鉴定结果后在已有知识的基础上进行合理推断得到最终结论。

采用此研究方法的原因：先理论后实践，最后进行合理推断。

4. 研究创新点

该毒株为本实验室污染细胞中分离所得，对其进行分析鉴定，了解其污染源可以有针对性的减少该污染，并丰富BVDV毒株库的内容，为日后科研工作打下扎实的基础。

5. 研究计划与进展

2017.9~2017.10学习并掌握mdbk细胞培养以及传代，为后续扩增病毒等打下基础。

2017.10~2017.12 分子生物学鉴定，测序并分离毒株，动物免疫实验。

2017.12~2018.1免疫荧光检测, 病毒tcid50测定，电镜观察。