1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)1 国内外研究概况1.1禽白血病病毒的结构和分类禽白血病又称之为禽白血病/肉瘤,是指由一类禽反转录病毒引起的鸡的良性及恶性肿瘤性疾病。
这类病毒通称为禽白血病/肉瘤病毒(avian leukosis/sarcoma viruses, alsv),但通常简称为禽白血病病毒(avian leukosis viruses, alv)。
alv中的罗斯肉瘤病毒 (rous sarcoma virus, rsv)是第一个被证明可诱发肿瘤的病毒。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标、内容和拟解决的关键问题1 研究目标了解辽宁省地方品种庄河大骨鸡f3代初产母鸡的禽白血病的感染情况及j亚群gp85基因的变异特点。
2 研究内容2.1 初产母鸡蛋清alv p27抗原检测。
对庄河大骨鸡f3代鸡群的120只母鸡3枚初产蛋的蛋清,采用alv p27抗原elisa检测试剂盒检测,了解庄河大骨鸡的alv感染情况。
3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析1 技术路线2 研究方法和实验方案2.1材料2.1.1 试验鸡群 对锦州医科大学试验农场饲养的辽宁地方鸡庄河大骨鸡f3代鸡群的120只母鸡3枚初产蛋的蛋清,采用alv p27抗原elisa检测试剂盒检测。
对检测阳性鸡,屠宰10只,无菌采集病料(肝脏、脾等组织)并液氮保存。
2.1.2主要试剂 df-1(鸡胚成纤维细胞)购自上海纪宁实业;细胞总rna提取试剂盒购自tangen公司;胎牛血清(fbs)、dmem细胞培养基购自gibco公司;dmso、trizol试剂购自北京索莱宝公司;琼脂糖、凝胶回收试剂盒(天根生化科技有限公司);rt-pcr试剂盒、marker dl5000、hs 聚合酶、pmd-18t载体试剂盒(takara公司);禽alv p27抗原elisa检测试剂盒(迪美诺生物公司)。
4. 研究创新点
特色或创新之处本研究是针对辽宁省国家种质资源保护品种庄河大骨鸡的禽白血病J亚群的感染情况及gp85基因的变异情况进行研究,填补了对庄河大骨鸡禽白血病的研究空白,不仅掌握了庄河大骨鸡ALV-J亚群gp85基因的变异特点,更了解了ALV致病性最强的J亚群感染状态,为生产中净化鸡群、提高种群健康水平提供了直接科学依据。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展第一阶段(2016.092016.11):查阅文献资料,确定研究方向和内容,撰写开题报告。
第二阶段(2016.122017.03):完成主要实验内容,即进行初产蛋蛋清的alv-j p27抗原的elisa试剂盒检测;完成病毒分离、rna提取、pcr扩增和产物克隆、测序;测序结果比较分析。
第三阶段(2017.042017.05):补充实验内容,完成毕业论文撰写和文献综述;撰写文章投稿到期刊,并进行论文答辩。
