1. 研究目的与意义
研究背景:
在目前的生物科学领域,ε-多聚赖氨酸的发展前景十分广阔,无论是在商业中还是工业生产中都占据十分重要的地位。而现在ε-多聚赖氨酸还存在很多弊端,例如,产量比较低,收益效率也不是令人十分满意,因此在相关行业中有时不是十分的明显,所以我们需要的是想办法提高ε-多聚赖氨酸的产量。本篇论文的研究目的也是很明确,主要是利用诱变的方法来的到收益很高的聚赖氨酸,因此我们在实验的培养基中选择添加金属含量来优化培养基,以此达到优化整个实验过程来提高聚赖氨酸的产量。同时也能为以后的相关实验奠定坚实的基础。
2. 研究内容和预期目标
研究内容:本次研究以白色放线菌刺糖多孢菌为生产菌株,优化产聚赖氨酸的培养基,因此在培养基中加入不同的金属离子对ε-多聚赖氨酸作用,来提高ε-多聚赖氨酸的产量。预期目标:在不同培养基内加入Ni、Co、Cu、Ca、Mn 5种金属离子的成分,根据其对菌体生长及产物的合成量的大小,选择出最佳的金属离子,后续对最佳的金属离子采用不同浓度梯度进行试验分析,筛选出适合ε-多聚赖氨酸生长的最佳浓度。最后,总结不同金属离子与ε-多聚赖氨酸的关系,从而提高ε-多聚赖氨酸的产量,为以后发酵罐的生产奠定坚实的基础。
3. 研究的方法与步骤
本课题采用的研究方法包括(1)培养方法:斜面培养,种子培养,摇瓶的发酵培养
(2)分析方法:湿重干重的测量,ph的测定方法,ε-多聚赖氨酸的测定,残留葡萄糖的测定。
(3)实验方法及步骤:采用广泛的ni、co、cu、ca、mn 5种金属离子筛选,筛选出最适宜的金属离子,采用最适宜的金属离子不同梯度进行筛选。确定最终能够提升ε-多聚赖氨酸产量的最终金属离子及浓度。后续采用摇瓶每8小时进行测定,包括分析数据等。
4. 参考文献
[1]王国良 、王金枝、韩文静、等.ε-聚赖氨酸及培养基影响其生物合成的研究进展[a].中国食品添加剂.2013(1):208-213.
[2] 谭之磊, 王甜, 宋帅,等. ε-聚赖氨酸高产菌株的诱变选育[j]. 中国食品添加剂, 2011, 43(5):14-17.
[3]王靓、李树、毛忠贵、等.融合重组菌streptomyce sp.feel-1产ε-聚赖氨酸的发酵培养基优化.中国农业科学导报.2013,15(1);76-83.
5. 计划与进度安排
(1)2022-2022-1学期17-20周~2022-2022-2学期第1周~第2周(2022-12-25~2022-3-16):查阅相关论文资料撰写开题报告,外文论文翻译,以及准备实验开始的所需材料仪器药品等。
(2)第3周~第6周(2022-3-19~4-13):选择ni2 、co2 、cu2 、ca2 、mn2 5种金属离子采用不同浓度加入发酵培养基,最终确定能够提高ε-聚赖氨酸产量的金属离子及其浓度梯度。
(3)第7周~第11周(2022-4-16~5-18):设置不同梯度浓度的cu2 ,摇瓶发酵3天后测定菌体浓度和ε-聚赖氨酸的产量。通过实验的最终结果,筛选出最适合聚赖氨酸生产的cu2 的浓度;将摇瓶每隔8小时取出进行测定,包括ε-聚赖氨酸的产量,ph,菌体含量及残糖变化;
