1. 研究目的与意义
1.研究背景
化学农药自诞生以来,在农林害虫的防治中发挥着极其重要的作用,保证了农林业的丰产和稳产。但是传统化学农药的大规模应用在为农业生产带来飞速发展的同时,也对生态环境和人类健康产生了巨大影响。化学农药的长期使用在杀伤害虫天敌的同时,也使得害虫的抗药性普遍提高,化学农药的残留问题更是对环境造成了严重的污染。传统化学农药引起的抗性,残留,害虫再猖獗等负面作用也是不容回避的,要实现农林业的可持续发展,就必须对农药提出高效,低毒,环境友好等更高的要求。为此,进行农药品种的更新换代成为近年来农药研发的热点,而生物源农药也取得了长足进步,特别是杀虫抗生素已成为杀虫剂中的“黑马”,备受关注。杀虫抗生素由于仿效 高,杀虫谱广,毒性相对低,对环境影响小,所以有较强的竞争力,较短时间内便在国内外农药市场中占据一定份额。
2.研究意义
2. 研究内容和预期目标
1.研究内容
本研究立足于国内外研究现状,以白色放线菌刺糖多孢菌为生产菌,设置不同铵离子浓度,用以研究铵离子对多杀菌素产量的影响,以及其对多杀菌素合成过程中相关酶的影响。具体研究内容如下:
1)将紫外诱变筛选得到的高产菌株甘油管进行稀释涂平板,进行活化,于28℃恒温培养7-10天。
3. 研究的方法与步骤
1.培养方法
(1)平板和斜面培养:将白色刺糖多孢菌接种在平板或斜面上,然后放置在28℃恒温培养箱中,培养8-10 d,使平板或斜面上长满白色孢子,具体时间看孢子生长情况,保藏备用。
(2)种子培养:取培养成熟的新鲜斜面,在超净工作台上加入5 ml无菌生理盐水,用灭菌竹签洗下孢子,取1 ml单孢子悬液加入种子培养基中,用八层纱布包好锥形瓶的瓶口并置于摇床中,200 rpm,28℃恒温培养72 h。
4. 参考文献
[1] 李月, 常城, 杨克迁. 多杀菌素生物合成途径及改造策略[j]. 微生物学报, 2011, 51(11):1431-1439.
[2] mertz f p, yao r c. saccharopolyspora spinosa sp. nov. isolated from soil collected in a sugar mill rum still[j]. international journal of systematic bacteriology, 1990, 40(1):34-39.
[3] 柴洪新, 史大昕, 张奇,等. 多杀菌素的研究进展[j]. 化工进展, 2011(s2):239-243.
5. 计划与进度安排
1)2022-12-25~2022-3-16:查阅资料撰写开题报告;
2)2022-3-19~2022-3-23:外文论文翻译,培养基制备与菌种的活化;
3)2022-3-24~2022-4-13:选取氯化铵作铵离子浓度梯度,采用单因素分析法,摇瓶发酵7-10天测定多杀菌素产量和菌体浓度,以及相关酶的活性。
