1. 研究目的与意义
1.研究背景
传统化学农药的大规模应用在为农业生产带来飞速发展的同时，也对生态环境和人类健康产生了巨大影响。化学农药的长期使用在杀伤害虫天敌的同时，也使得害虫的抗药性普遍提高，化学农药的残留问题更是对环境造成了严重的污染。此外，我国是人口大国也是一个农业大国，有超过2.4亿农民，农村储粮约占粮食总产量的70%-80%，自2004年以来，粮食产量历史性地实现十二连增，粮食产量连续3年稳定在1.2万亿斤以上，但由于储粮设施简陋、储藏条件差、储粮技术落后、缺乏科学管理手段等原因，粮食受虫蚀、霉变、鼠害等危害造成的损失较为严重，储粮损失达3%-5%。同时，我国的粮食供求仍然处于紧平衡状态，粮食丰收的同时也在大量进口粮食，粮食消费需求也在同步持续增长，除保护耕地保障粮食供给端外，粮食储藏安全也将直接影响粮食的供应量。特别是在近两年国际粮食供给宽松，国内粮食连年增产，粮食加工、仓储企业库存高企的形势下，粮食储藏安全问题形式更加紧迫。
2.研究目的
本论文将立足于国内外研究现状，以白色放线菌刺糖多孢菌为研究对象，在ph调控策略下选择不同的补料，通过实验数据选择最佳发酵的补料生产多杀菌素，以期提高刺糖多孢菌的发酵生产多杀菌素的水平。
2. 研究内容和预期目标
本研究立足于国内外研究现状，以白色放线菌刺糖多孢菌为生产菌株，利用5 l发酵罐发酵，在ph调控策略下，分别间歇流加葡萄糖，葡萄糖和棉籽蛋白，全料，并连续流加全料，从而使菌体在发酵时能最大限度地提高多杀菌素的产量，具体研究内容如下：
1）将甘油管中保藏的刺糖多孢菌孢子悬液接种到平板上进行活化处理，于28℃恒温培养7-10天。
2）在ph调控策略下，利用5 l发酵罐，间歇流加600 g/l葡萄糖，每隔8 h取样分析，测定其温度、ph、溶氧、葡萄糖含量、菌体浓度、多杀菌素产量等指标。
3. 研究的方法与步骤
主要研究方法：发酵罐发酵。
1.发酵工艺流程： 甘油管贮存菌种→接种平面培养基→接种斜面培养基→接种种子培养基→接种发酵培养基→取样，离心分离菌体，收集上清→进行参数分析。
2.研究技术路线：在ph调控策略下，分别间歇流加葡萄糖，葡萄糖和棉籽蛋白，全料，并连续流加全料，从而使菌体在发酵时能最大限度地提高多杀菌素的产量。
4. 参考文献
[1] 李月, 常城, 杨克迁. 多杀菌素生物合成途径及改造策略[j]. 微生物学报, 2011, 51(11):1431-1439.
[2] mertz f p, yao r c. saccharopolyspora spinosa sp. nov. isolated from soil collected in a sugar mill rum still[j]. international journal of systematic bacteriology, 1990, 40(1):34-39.
[3] 柴洪新, 史大昕, 张奇,等. 多杀菌素的研究进展[j]. 化工进展, 2011(s2):239-243.
5. 计划与进度安排
（1）2022-2022-1学期17-20周~2022-2022-2学期第1周~第2周（2022-12-25~2022-3-16）：查阅资料撰写开题报告，外文论文翻译；斜面培养基制备与菌种的活化；
（2）第3周~第6周（2022-3-19~4-13）：在ph调控基础上，利用5 l发酵罐，间歇流加600 g/l葡萄糖，维持糖浓度在10 g/l以上，取样测定发酵液菌体浓度和多杀菌素产量；在ph调控基础上，利用5 l发酵罐，间歇流加600 g/l葡萄糖和250 g/l棉籽蛋白，维持糖浓度在10 g/l以上，取样测定发酵液菌体浓度和多杀菌素产量；
（3）第7周~第11周（2022-4-16~5-18）：在ph调控基础上，利用5 l发酵罐，间歇流加全料，维持糖浓度在10 g/l以上，取样测定发酵液菌体浓度和多杀菌素产量；在ph调控基础上，利用5 l发酵罐，连续流加全料，维持糖浓度在10 g/l以上，取样测定发酵液菌体浓度和多杀菌素产量；
