1. 研究目的与意义
甾体说的就是类固醇类物质，通常指这一类的激素：肾上腺皮质激素、雄激素、雌激素，具有一定的作用。
与非甾体类药物对应的一般说的是肾上腺皮质激素，各种名字以松结尾的药物，具有一定的抗炎作用。
非甾体类药物主要是双氯芬酸类还有布洛芬类还有cox2抑制剂类。
2. 研究内容和预期目标
本论文研究主要内容如下：（1）参考文献，找到并获得适合的分枝杆菌；（2）分枝杆菌活化，扩培作为实验主要菌种；（3）进行培养基的制备、灭菌并形成斜面培养基；（4）参考文献进行分枝杆菌的化学诱变突变实验；（5）对突变后9-oh-ad分枝杆菌的产生9-oh-ad的能力进行鉴别；（6）计算汇总所得数据，参考文献，对数据进行分析。
(7) 将产9-oh-ad量相对较高的优良菌种于-4℃冰箱中低温保存。
预期目标：采用适当的方法对分枝杆菌进行扩培，以及诱变培养。
3. 研究的方法与步骤
研究方法：一、制备斜面培养基将分枝杆菌活化、扩培；二、制定分枝杆菌生长曲线；三、分枝杆菌诱变：将分枝杆菌培养到对数期时离心洗涤，用缓冲液制成8ml菌悬液，加入0.2ml硫酸二乙酯（des)溶液保温处理（20~60min)后，加入0.5ml 25%硫代硫酸钠终止反应，低温离心洗涤除去相关溶液，将20ml液体培养基加入菌体沉淀物中摇床培养1.5~2h后稀释分离。
选取各浓度培养皿中存活下来的分枝杆菌诱变菌接入斜面培养基中保存待用。
四、挑取保存好的诱变分枝杆菌以及原菌分别接入到50/250ml锥形瓶中进行发酵摇床30度、200r/min培养，发酵结束后采用高效液相色谱法测定各自锥形瓶发酵液中9-oh-ad含量，得出各自含量从而确定几种筛选菌种中9-oh-ad产量效率最好的菌株。
4. 参考文献
[1] 石军,陈安国,张云刚.植物甾醇制备、生理功能及应用研究进展[J].粮脂.2002(05)[2] 赵国志,刘喜亮,刘智锋.植物甾醇及其产品开发利用(上)[J].粮食与油脂.2006(02)[3] 梁艳,张英,吴晓琴.植物甾醇的提取分离和分析检测方法研究进展[J].中国粮油学报.2006(03)[4] 白群安.植物甾醇的研究进展[J].饲料博览.2009(06)[5] 郝超,胡传荣,张玉林.植物甾醇羟基值测定方法的研究[J].农业机械.2011(26)[6] 宋文生,王宏雁,夏萍,赵立波.植物甾醇应用技术研究进展[J].粮食与油脂.2013(10)[7] 李万林,钟姣姣,杨忆群,赵楠,王勇.植物甾醇提取及分析检测方法研究进展[J].饮料工业.2013(12)[8] 王雅琼,许文林,黄一波.重结晶法分离混合植物甾醇中豆甾醇[J].扬州大学学报(自然科学版).2002(02)[9] 盛漪,丁霄霖,陶冠军,王利平.植物甾醇分析和纯化[J].中国油脂.2005(03)[10] 陈茂彬,黄琴,吴谋成.植物甾醇油酸酯产品的合成工艺研究[J].中国油脂.2005(06)
5. 计划与进度安排
1、2022-2-28～2022-03-24 接受任务、查阅和翻译文献、撰写及完成开题报告；2、2022-03-25～2022-04-10原材料处理，实验器材清理，准备。
配置各实验所需的各类试剂，同时完成对实验菌种的准备；3、2022-04-11～2022-05-06对分枝杆菌菌种进行化学诱变，斜面保存存活下来的菌；4、2022-05-07～2022-05-19对分枝杆菌菌种生产9-OH-AD的能力进行测试，探究实 验结果5、2022-05-20～2022-06-13撰写毕业论文及论文答辩。
