trs120-3突变体花粉发育表型的观察与分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.本课题研究意义

1.1花粉发育的重要性

花粉发育是植物体生命周期中一个重要且复杂的过程，需要多种基因共同参与。它是植物育种的关键步骤，对于成功育种和形成种子具有不可或缺的作用。花粉发育主要由三个主要阶段组成：小孢子发生（造孢细胞的分化与减数分裂）；小孢子减数分裂后的发育以及小孢子有丝分裂。造孢细胞（花粉母细胞或减数分裂细胞）被包裹在绒毡层衍生的胼胝质壁内，并经历减数分裂以形成单倍体小孢子的四分体。这一胼胝质层对花粉壁支架的发育和形成至关重要，它随后分解，小孢子被释放到花药室，开始雄性配子体发育(减数分裂后发育)。然后，游离的微囊经过一或二轮有丝分裂，使花粉壁继续形成。成熟的花粉可能是三细胞或双细胞的，最终有丝分裂发生在花粉管中。花药花丝迅速伸长，花和花药随后开放，使花粉有效释放^[1]。孢子的花药组织，特别是绒毡层细胞层，在发育和调控中起着至关重要的作用。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标

制备trappii复合物trs120亚基突变体trs120-3，并通过亚历山大染色（观察及鉴定花粉所处的发育时期）、扫描电镜观察以及dapi染色（dapi为一种可与dna结合的荧光染料，可用于活细胞和固定细胞的染色）等实验方法，进行不同时期花粉发育的观察，确定突变体表型产生突变的时期，探究该突变体的表型及形成原因。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法

1.1 铺种子

取适量种子于离心管中，加适量75%酒精，颠倒混匀3min；倒掉酒精后，加入次氯酸钠（1:50稀释后使用），颠倒混匀10min；倒掉液体后，分5次加入适量ddh₂o（灭菌蒸馏水），前两次颠倒混匀2min，后三次1min。操作完成后将种子铺到平板上。

4. 研究创新点

创新之处

目前TRAPPII在花粉发育中的功能目前还很不清楚，所以研究TRAPPII复合物TRS120亚基突变体trs120-3花粉发育的表型，对于了解花粉发育过程中囊泡外泌机制具有重要意义。本实验通过多种方法观察分析不同时期拟南芥突变体的花粉表型，有助于全面研究囊泡外泌机制及TRAPPII在花粉发育中的功能。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

2019.10-2019.12 熟悉实验室基本情况，查阅相关文献，向师兄师姐学习基本实验操作

2019.12-2020.04 进行系统试验，获取突变体，进行成熟花粉发育表型观察及不同时期花粉观察；并基于已有实验数据进行整理分析