1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1 本课题的意义
昆虫病原线虫（entomopathogenic nematodes，简称epns）是一类携带专性共生菌的昆虫寄生性线虫，是多种昆虫的寄生性天敌，是近几十年发展起来的一种非常有潜力的生物防治因子[1]。由于昆虫病原线虫寄主范围广泛，主动搜索寄主能力强且对土栖性及钻蛀性害虫与隐蔽性害虫有特殊防效，对人畜安全且不会污染环境、亦不会产生抗性、且能以低成本大规模生产、侵染致死有效性高并能与化学杀虫剂混用[2-3]，故其有着重要的应用价值与广阔的应用前景[4]。epns已在防治多种土壤害虫和隐蔽害虫方面发挥了重要的作用[5]，受到科学和界产业界高度重视[6]。
目前已发现的epns有3类：异小杆类（异小杆科，heterorhabditidae)、斯氏线虫类（斯氏线虫科，steinernematidae）和拟异小杆类 (小杆科拟异小杆属，heterorhabditidoides)，分别与发光杆菌属（photorhabdus)、致病杆菌属 (xenorhabdus)和沙雷氏菌属（serratia）的部分细菌共生[14-17]。在epns-共生菌这类共生体中，起主要杀虫作用的是存在于epns肠道内与其共生的共生菌[15,17-21]；共生菌被抑制或去除epns就会完全或部分失去致病性[15,17,19-23]。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：
1.分离并鉴定2株昆虫病原线虫共生菌菌株
2.分析共生菌的生理生化特性
3. 研究的方法与方案
1 研究方法
实验室利用大蜡螟末龄幼虫作为两种昆虫病原线虫的寄主，致死昆虫后，采用white trap法收集epn的侵染期幼虫。用血淋巴涂布法分离两种共生菌。聚合酶链式反应法（pcr）扩增分离到的单菌落的16srdna序列并交由通用生物公司测序。利用mega6.0软件的邻接法构建系统发育树。革兰氏染色法和其他生物化学实验法检测两种细菌的理化特性。
4. 研究创新点
1.从两种生防效果突出的昆虫病原线虫steinernema.glaseri和heterorhabdus.indica中分离出两株共生菌进行鉴定。
2.为进一步研究两种共生菌的杀虫活性物质和活性基因提供基础。
5. 研究计划与进展
2019.1-2019.3
两类昆虫病原线虫的培养；
共生菌的分离与保藏
