高产四氢嘧啶菌种的分离及其紫外诱变研究开题报告

 2022-02-07 20:46:26

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1.本课题的意义

在高盐环境中,绝大多数的中度嗜盐菌可以合成以四氢嘧啶为主的多种相容性溶质(糖类、糖苷类、氨基酸类、甜菜碱等),通过阻断其他相容性溶质的合成通路,可以诱导中度嗜盐菌合成更多的四氢嘧啶以维持生存,以便获得更有利于大规模生产的四氢嘧啶菌株。另外,细菌泌乳法制备四氢嘧啶时,菌体可以重复使用,不仅可以节约成本、提高效率,还能使其合成量大幅提高,具有更大的应用潜力。

本课题的目的在于分离、筛选以四氢嘧啶为主要相容性溶质的中度嗜盐菌,并通过育种技术阻断其他相容性溶质的合成通路,获得高产四氢嘧啶突变株,并研究分离菌株及突变株的发酵条件以及细菌泌乳法合成四氢嘧啶的可行性。

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标:

获得野生型产四氢嘧啶中度嗜盐菌,通过育种获得稳定的高产四氢嘧啶突变株,进而优化发酵条件大幅提升四氢嘧啶的产量,建立高产四氢嘧啶的细菌泌乳工艺。

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3. 研究的方法与方案

研究方法:

产四氢嘧啶的中度嗜盐菌采用稀释平板法分离;

高产四氢嘧啶突变株采用诱变、基因敲除等育种手段获得;

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4. 研究创新点

(1)本研究利用诱变、基因敲除等育种手段,阻断其他相容性溶质的合成通路,获得高产四氢嘧啶突变株。目前还没有通过紫外诱变筛选甘氨酸/胆碱缺陷型菌株方法以提高四氢嘧啶产量的相关研究。(2)进一步优化发酵条件,以及建立高产四氢嘧啶的细菌泌乳工艺,为实现四氢嘧啶的高产量生物发酵奠定基础。

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5. 研究计划与进展

2019.12-2020.01:查阅文献、菌株分离、生理生化鉴定和种属鉴定

2020.01-2020.02:分别进行碳氮源实验,得到较好的碳源和氮源

2020.03-2020.04:高产四氢嘧啶中度嗜盐菌的育种

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