1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
课题意义线虫(nematodes)属于线虫动物门(nematoda),目前已有超过两万五千种被描述[1],在生态上具有丰富的多样性。
其中超过三千多种线虫以昆虫为兼性或专性营养来源[2],是昆虫的自然天敌。
近年来,农业害虫防治的方向已逐步从传统的化学防治转向环保、高效的生物防治,应用食虫线虫控制农业、林业害虫也取得了可观的成果[3][4],但由于不同种类的线虫在对昆虫的致死率上有较大差异[5],对环境温度和湿度的需求也不相同[6],因此食虫线虫的分类研究不仅有助于人们更好地理解特化物种的进化过程,还可以为其在农林业上的具体应用提供参考。
2. 研究的基本内容和问题
目标:确定该种线虫是否为新种;建立分子系统发育树,确定其在科内、属内的进化位置;描述其形态学特征;测定该种线虫对昆虫的致死能力并评估其在农业生物防治上是否有一定应用价值。
内容:1.利用线虫18s rdna序列进行匹配,确定该种线虫的属或近缘属2.在光学显微镜和扫描电子显微镜下观察线虫标本,测量相关性状并与属内其他线虫进行比对,找出区分性状。
3.利用线虫its序列构建属内系统发育树,进一步确定该种线虫在属内的进化位置以及近缘种。
3. 研究的方法与方案
研究方法及实验方案:1.对线虫进行培养扩繁。
取大蜡螟末龄幼虫置于玻璃培养皿中,加2~3ml水湿润皿底,将线虫接种到皿内。
玻璃皿置于恒温箱中20℃下培养。
4. 研究创新点
本课题鉴定的线虫为Pristionchus属线虫或属外近缘种,该类线虫的应用研究较少,测定出侵染力将为其应用提供参考。
5. 研究计划与进展
2017/092017/12 查阅资料,制定实验方案,学习基础实验方法2018/012018/03 完成形态学指标观察和测量2018/032018/04 完成以ITS序列建立的贝叶斯树,确定该种线虫在属内的分类位置2018/042018/05 完成侵染力测定和杂交实验。
整理数据,撰写论文初稿
