1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等1.1 课题来源实验室自选课题1.2 研究目的与意义噬菌体治疗技术由来已久。
噬菌体治疗的研究始于上世纪初[1],之后由于抗生素的出现及其他原因在美国和西欧等国家中断。
近年来,由于抗生素的不合理使用,导致了超级细菌的爆发,严重威胁到动物和人的生命健康。
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2. 研究的基本内容和问题
研究的目标、内容和拟解决的关键问题2.1 研究目标本研究通过从污水样中分离宿主谱广的噬菌体,利用转座子插入失活的方法,筛选噬菌体感染肺炎克雷伯杆菌受体相关基因,为利用噬菌体治疗多重耐药菌感染奠定基础,也为噬菌体感染机制研究提供参考依据。
2.2 研究内容(1)研究肺炎克雷伯杆菌噬菌体的分离方法。
(2)肺炎克雷伯杆菌噬菌体的感染受体的鉴定方法的初探。
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3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线及可行性分析3.1 实验材料(1)实验室保种保存的23种肺炎克雷伯杆菌。
(2)从南京农业大学西门、秦淮河、瑞金路等地点取的水样。
3.2 研究方法(1)噬菌体的分离纯化取不同的水样分别经过过滤、平板培养等手段纯化获得纯的噬菌体,将单噬菌斑置于sm保存液中于4℃冰箱保存。
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4. 研究创新点
特色或创新之处实验材料的选取便有其独特之处:分离纯化新型肺炎克雷伯杆菌噬菌体,并对其感染宿主菌的受体进行筛选和鉴定,为噬菌体治疗肺炎克雷伯杆菌在肠道的定殖奠定基础。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展研究计划:2015.9完成噬菌体的分离纯化及一系列生物特性的测定研究。
2015.10-2016.3多次建库、筛选并进行基因的鉴定与分析。
2016.4对实验结果进行整理,分析。
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