1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
一.本课题的研究意义
β-葡聚糖是由β-d-葡萄糖残基通过β-1,3 或β-1,4-糖苷键连接而成的多聚糖, 是谷类植物细胞壁的主要组分, 广泛存在于大麦、黑麦、小麦和稻米等禾本科谷物及酵母[1], 与阿拉伯木聚糖、戊聚糖、纤维素、果胶等均属植物细胞壁中的可溶性结构性非淀粉多糖。
根据糖苷键连接类型, β-葡聚糖可分为β-1,3-1,4-葡聚糖(地衣多糖)、β-1,4-葡聚糖(纤维素)、β-1,3-葡聚糖(昆布多糖)和β-1,3(4)-葡聚糖[2]。按照水解β-葡聚糖的特异性可将葡聚糖酶主要分为特异性的β-1,3-1,4-葡聚糖酶(地衣多糖酶, ec3 . 2 . 1 .73)、非特异性的β - 1 , 3 (4) -葡聚糖酶(ec3.2.1.6)、β-1,4-葡聚糖酶(纤维素酶, ec 3.2.1.4)和β-1,3-葡聚糖酶(昆布多糖酶, ec 3.2.1.39)等4 类。β-1,3-1,4-葡聚糖酶专一性催化混合糖苷键中邻近β-1,3-糖苷键的β-1,4-键的水解反应, 而不水解β-1,4-葡聚糖。β-1,3(4)-葡聚糖酶能水解β-葡聚糖中的β-1,3 或β-1,4-糖苷键, 底物包括昆布多糖、地衣多糖及谷物类d-葡聚糖。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：
本研究主要在于利用已建立的β-1,3葡聚糖酶克隆载体，使用基因分子克隆技术将该基因实现异源表达，尝试改变相关条件实现目的基因的高效表达，最后对该酶的酶学性质进行研究。为后期大规模的工业发酵提供前期的基础研究准备。
研究内容：
3. 研究的方法与方案
研究方法： 1.生物信息学技术 2.PCR技术 3.核酸电泳技术 4.分子生物学技术 5.蛋白质纯化技术 6.酶学性质
技术路线： 见附件。
实验方案及可行性分析： 本研究的实验方案见技术路线，完成本课题所在的实验室是环境微生物农业部重点实验室，长期致力于基因克隆以及蛋白质结构功能的研究，拥有一流的实验设备和实验方案。该实验方案是本实验室常用的技术路线设计的，对于完成这个课题具有很好的可行性。
4. 研究创新点
利用TRx标签载体实现了β-1,3-葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的可溶性异源表达。
5. 研究计划与进展
（1）2014.12-2015.01：β-1,3-葡聚糖酶表达载体构建 。
（2）2014.02-2015.03：表达菌株的转化和重组酶诱导表达。
（3）2015.04-2015.05：重组酶纯化和酶学性质研究。
