1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
田菁茎瘤菌（azorhizobium caulinodansors571 ）在与田菁建立的共生关系时，可同时形成根瘤和茎瘤。
茎瘤与根瘤相比有固氮酶活性高，固氮量大等优点，所以研究田菁茎瘤菌具有十分重要的意义。
而田菁茎瘤菌中的ros的相关研究却知之甚少。
2. 研究的基本内容和问题
目标：通过本实验，检测在体外条件下H2O2相关基因katG以及oxyR的调控机制内容：（1）构建菌株Δ katG，ΔoxyR，Δ katG （pYC12- katG）和 ΔoxyR（pYC12- oxyR）,WT(pVIK112-PkatG）；（2）确定不影响WT生长的最高的H2O2工作浓度，进而检测katG基因在WT菌株和ΔoxyR中表达情况；同时，检测WT、Δ katG、 ΔoxyR，及缺失互补株的生长情况；拟解决的关键问题：各种重组载体，敲除菌株的构建，及检测条件的建立。
3. 研究的方法与方案
2. 拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析研究方法与实验方案：2.1Δkatg和Δoxyr敲除株的构建2.1.1katg overlapping pcr用clone manager 设计引物序列，以http://www.microbesonline.org/上ors571的基因组为模板，并根据需要加入克隆所需要的酶切位点和保护碱基，所用引物为azc3290-1（ecori），azc3290-2，azc3290-3，azc3290-4(xbai），其中azc3290-2和azc3290-3引物之间有26bp互补序列。
按照如下overlapping pcr程序扩增获得azc3290两端序列拼接片断。
pcr反应体系1（azc3290上游区域dna的扩增）：10taq buffer （含mg2 ） 10 μldntp (各2.5mmol/l) 6 μlazc3290-1引物（10μmol/l） 2 μlazc3290-2引物（10μmol/l） 2 μlrtaq 0.4 μlprimestar 0.2 μl模板dna 1 μlddh2o 86.7 μlpcr反应条件：预变性95℃ 5min；变性94℃ 30 s，退火58℃ 30 s，延伸 72℃45 s（30个循环）；72℃末端延伸10min。
4. 研究创新点
田菁茎瘤菌（Azorhizobium caulinodans ORS571）中ROS的相关研究还知之甚少。
而本实验立足于ROS中的H2O2相关基因oxyR的调控机制的研究，具有十分重要的意义。
5. 研究计划与进展
1）成功获得Δ katG，ΔoxyR，Δ katG （pYC12- katG）和 ΔoxyR（pYC12- oxyR）,WT(pVIK112-PkatG）菌株；（2）测定ΔoxyR相关基因的生长曲线
