1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
[1]植物学报，actabonica sinica，2001年10期，林芳植物信号传导中的磷脂酶[2]el-mekkawy s, meselhy mr, nakamura n et al.anti-hiv-1 and anti-hiv-1 protease substances from ganoderma lucidum[j ]. phytochem., 1998,49(6): 1651-1657.[3]fang q. h., j. j. zhong, effect of initial ph on production of ganoderic acid and polysaccharide by submerged fermentation of ganoderma lucidum[j ], proc. biochem., 2002, 37:769774[4]哈尔滨工业学报，journal of harbin institute of fechnology，2006年02期，宋颖琦磷脂酶在植物逆境胁迫信号传导中的作用[5]fang q. h., y. j. tang, j. j. zhong,significance of inoculation density control in production of polysaccharide and ganoderic acid by submerged culture of ganoderma lucidum, [j ] proc. biochem., 2002, 37:13751379[6]牛君仿，方正等。
灵芝有效化学成分研究进展。
河北农业大报：1000-1573（2002）s1-0051-04[7]李平作等。
2. 研究的基本内容和问题
1. 研究目标通过研究磷脂酶c基因的沉默与过表达对灵芝菌丝生长和次生代谢的影响，探讨磷脂酶c的酶促反应与灵芝次生代谢尤其是三萜类化合物代谢的关系，为阐明通过酶合成代谢影响次生代谢产物灵芝三萜生物合成的分子机制奠定基础。
2．研究内容 2.1 磷脂酶c基因沉默、正常和过表达下灵芝的生长情况。
2.2 研究磷脂酶c基因沉默、正常和过表达下灵芝三萜及其他次生代谢产物产量的变化，并检测中间代谢产物鲨烯和羊毛甾醇的变化，同时检测相关基因的表达。
3. 研究的方法与方案
1．研究方法1) 对实验用的灵芝菌种分三组处理，第一组不做处理，设为对照；第二组将菌种的磷脂酶c基因沉默；第三组通过导入强启动子或者增强子使磷脂酶c基因过表达。
采用摇床培养法培养液体菌种，液体培养基培养灵芝，观察灵芝生长情况，测定灵芝三萜和其他次生代谢产物产量的变化，uplc检测鲨烯和羊毛甾醇产量。
2) 将三组不同处理的菌种采用平板培养，插片观察菌丝形态及分叉。
4. 研究创新点
本实验系统地研究了磷脂酶C表达量对灵芝三萜生物合成的影响，对磷脂酶C与灵芝次生代谢的关系进行了初步研究。
研究计划及预期进展
5. 研究计划与进展
1. 研究计划1) 2014.12-2014.12 查阅资料，整理实验思路，准备实验器材2) 2014.12-2015.1 初步研究不同磷脂酶c表达量对灵芝生长及三萜的影响，分析结果，总结经验3) 2015.02-2015.03 开始做不同表达量梯度实验，同时观察菌丝分叉。
收集、整理、处理实验数据。
4) 2015.03-2015.04 处理分析实验数据方差分析，f因子测验，多重比较分析，写毕业论文（设计）2. 预期进展1) 确定磷脂酶Ｃ表达量对灵芝菌丝生长和次生代谢的具体影响。
