1. 研究目的与意义
银杏是我国特有的集果用、材用、叶用及园林绿化为一体的多用途经济树种。
尽管对银杏营养贮藏蛋白的分布特点和动态变化等方面有了一定的研究，但有关银杏的营养贮藏蛋白功能特性方面研究较少。
本文旨在对银杏营养贮藏蛋白质的进行溶解性分析、热稳定性分析、紫外吸收光谱分析、傅里叶红外光谱分析、荧光光谱分析分析、巯基含量分析，以揭示银杏营养贮藏蛋白质功能特性，为银杏营养贮藏蛋白的深入开发利用奠定理论基础。
2. 国内外研究现状分析
国内外研究者目前对木本植物的营养贮藏蛋白已经有了比较深入的研究，对木本植物VSP的类型、定位、功能、合成及降解机理、基因表达的调控等方面都积累的丰富的资料，但对于银杏的营养贮藏蛋白研究只局限于分布特点、变化规律等生物学特性，关于银杏营养贮藏蛋白功能特性的研究鲜见报道。
3. 研究的基本内容与计划
1 研究内容 1.1工艺路线 银杏枝条样品的预处理贮藏粗蛋白提取粗蛋白的分离纯化（硫酸铵沉淀、离子交换层析、凝胶过滤）蛋白质特性研究（溶解性、热稳定性、紫外吸收光谱、傅里叶红外光谱、荧光光谱、巯基含量分析） 1.2银杏营养贮藏蛋白的特性研究 1.2.1 蛋白pH稳定性研究 取浓度为2 mg/mL的银杏营养贮藏蛋白水溶液，置于6个10 mL试管，标记为1-6，每试管1.5 mL，然后用0.1 mol/L的HCl和0.4 mol/L的NaOH调整pH值，使得各个试管内pH依次为2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0，之后用蒸馏水补充溶液到2 mL，静置6 h，之后于10000 r/min离心20 min，用考马斯亮蓝法测定上清液的蛋白浓度。 1.2.2 DSC法研究蛋白热稳定性 采用差示扫描量热法测定银杏营养贮藏蛋白的热性能，取一定量的蛋白冻干粉置于铝盒中压片，以空铝盒为对照，氮气流速为20 mL/min，扫描范围为30-150℃，升温速度10℃/min，进行热性能测定。 1.2.3 加热法研究蛋白热稳定性 取浓度为2 mg/mL的银杏营养贮藏蛋白水溶液，置于8个10 mL试管，标记为1-8，每试管1 mL，分别在40℃、60℃、80℃、100℃加热30 min，之后冷却到室温，用蒸馏水补充液体到2 mL，于10000 r/min离心30 min，用考马斯亮蓝法测定上清液的蛋白浓度。以未经热处理的蛋白为对照。 |
1.2.3 加热法研究蛋白热稳定性 取浓度为2 mg/mL的银杏营养贮藏蛋白水溶液，置于8个10 mL试管，标记为1-8，每试管1 mL，分别在40℃、60℃、80℃、100℃加热30 min，之后冷却到室温，用蒸馏水补充液体到2 mL，于10000 r/min离心30 min，用考马斯亮蓝法测定上清液的蛋白浓度。以未经热处理的蛋白为对照。 1.2.4 蛋白的NaCl稳定性 取浓度为2 mg/mL的银杏营养贮藏蛋白水溶液，置于7个10 mL试管，标记为1-8，每试管1 mL，分别加入浓度为2%、4%、6%、8%、10%、12%的NaCl溶液1 mL，充分搅拌30 min，然后10000 r/min离心30 min，测定上清液中蛋白浓度。以加同体积的蒸馏水为对照。 1.2.5 紫外吸收光谱分析 用紫外分光光度计分别对中性（pH=7）、酸性（pH=2）、碱性（pH=10）条件下的银杏营养贮藏蛋白进行200-300 nm 波长范围的光谱扫描，测定最大紫外吸收峰，分析其空间结构。 1.2.6 傅里叶红外光谱分析 将银杏营养贮藏蛋白样品与一定量干燥后溴化钾混合并研磨均匀，用傅立叶变换红外光谱仪对样品在400-4000cm-1之间进行扫描。 1.2.7 荧光光谱分析 用荧光光度计分别对中性（pH=7）、酸性（pH=2）、碱性（pH=10）条件下的银杏营养贮藏蛋白进行光谱扫描，分析蛋白的荧光性质。 1.2.8 巯基含量分析 用 Ellman氏试剂(DTNB)分析法测量银杏营养贮藏蛋白质分子表面巯基。及全部巯基含量，分析其结构。 2研究计划 第一阶段 12周 （3.1-3.14）： 查资料、确定实验方法、撰写开题报告； 第二阶段 34周 （3.15-3.28）：银杏营养贮藏蛋白原料的处理及预实验； 第三阶段 511周 （3.29-5.10）：银杏营养贮藏蛋白的特性研究实验； 第四阶段 1213周（5.12-5.28）：试验结果分析、毕业论文撰写； |
4. 研究创新点
对银杏营养贮藏蛋白的特性研究鲜见报道。
本课题通过测定蛋白溶解性、巯基含量；运用傅里叶红外光谱、紫外光谱、荧光光谱对蛋白进行光学分析，研究银杏营养贮藏蛋白的功能特性，旨在为银杏营养贮藏蛋白的深入开发利用奠定理论基础。
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