1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
绿豆及其芽菜营养丰富,富含蛋白质、碳水化合物、脂肪、矿物质等营养元素,在我国使用广泛[1]。
绿豆中还含一种常见的抗营养物质植酸。
植酸(phytic acid)又名肌醇六磷酸,有12个可取代活性位点,在生物体内可以螯合二价和三价矿质元素和蛋白质,形成稳定的复合物,植酸盐复合物难以被人体和单胃动物消化利用,大部分的磷和矿物质被排出体外,由此造成营养素缺乏和环境污染[2]。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标1、外源添加多胺(腐胺、亚精胺、精胺),筛选其促进绿豆芽菜中植酸降解的最优浓度,及最佳试剂种类。
2、研究发芽过程中多胺及其内源合成酶抑制剂对绿豆芽菜生理代谢的影响。
3、研究发芽过程中多胺及其内源合成酶抑制剂对内源多胺含量的影响;4、研究发芽过程中多胺及其内源合成酶抑制剂对植酸降解代谢的影响;5、探讨多胺对绿豆芽菜植酸降解的作用机理。
3. 研究的方法与方案
实验方法绿豆(秦豆20,江苏省农科院提供,-20℃储存)挑选饱满完整的绿豆籽粒,用浓度为 1.0%的次氯酸钠浸泡消毒 15 min 后,用去离子水清洗6次,然后在 30℃ 下用去离子水浸泡 5 h 后置于自动喷淋发芽机(bx-801,浙江)中, 30℃ 黑暗条件下发芽,每隔 24 h 更换喷淋液。
试验设置:多胺浓度筛选:腐胺(put):0-250 μm;亚精胺(spd):0-240 μm;精胺(spm): 0-150 μm在上述试验基础上,设置以下处理:(1) 对照(ck)(2) 180 μm亚精胺(spd)(3) 2 mm二环己胺(dcha)(4) 180 μm亚精胺 2 mm二环己胺(dcha spd)分别在发芽36h、48h和72h采样。
技术路线可行性分析本研究计划是基于添加外源多胺能促进豆类芽苗中植酸降解的事实基础上进行的研究。
4. 研究创新点
1、关于多胺在植酸降解中作用的研究未见报道;2、首次建立多胺与植酸降解的关系,探索作用机理。
5. 研究计划与进展
一、研究内容1、不同种类多胺对植酸降解代谢的影响2、多胺及其抑制剂对绿豆芽菜生长及植酸降解代谢的影响二、实验方案1、试验材料绿豆(秦豆20,江苏省农科院提供,-20℃储存)。
2、主要仪器与试剂pgx-150智能培养箱;贝欣bx-801豆芽机;multiskan fc型酶标仪;uv-2802型紫外-可见分光光度计;电感耦合等离子体发射光谱;agilent1200高效液相色谱。
dowex 18 100-200离子交换树脂;三氯化镧、维拉帕米、钌红、多聚甲醛、戊二醛、焦锑酸钾、2-(n-吗啉)乙磺酸-水合物(mes)、edta2na、钼酸铵、丙酮、磺基水杨酸、硫酸、盐酸、硫酸钠、三氯化铁、氯化钙等。
