不同浓度Nisin对单增李斯特菌的抑制效果开题报告

 2022-01-21 21:29:40

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

(一)、课题的研究意义单核细胞增生李斯特氏菌(lmonocytogenes)简称单增李斯特菌,是一种人畜共患病的食源性病原菌,也是唯一一种可引起人类疾病的李斯特菌,由于李斯特菌感染所产生的病被称为李斯特菌病[1]。

它是一种革兰氏阴性兼性厌氧细胞内寄生菌,膜外可以生成荚膜,拥有极高的环境抗逆性,它往往存在于各种环境中,例如动植物的腐殖质、水或土壤中,并污染多种食物[2]。

随着各种即时食物的发展,人们过上了无需加热便食用食物的便捷生活,但这也给单增李斯特菌病的爆发提供了机会。

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标本课题拟选择对单增李斯特菌具有抑制作用的nisin为研究对象,研究nisin对单增李斯特菌的抑制效果。

确定抑制单增李斯特菌生长的最适合浓度,进而进行贮藏实验研究,为日后的食品工业生产提供依据。

研究内容1)nisin抑制单增李斯特菌的最佳浓度研究以等浓度梯度的nisin进行单增李斯特菌的抑制实验,测定mic2)nisin的贮藏实验研究以nisin抑制单增李斯特菌的mic作为试验浓度,做贮藏实验,定时涂布,利用baranyi模型绘制单增李斯特菌的生长曲线,证实其抑制单增李斯特菌生长的有效性。

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3. 研究的方法与方案

1、研究方法及试验方案(1)菌体活化从斜面固体培养基取一环单增李斯特菌菌种接种于bhi液体培养基中,在37℃,150r,摇床16h培养至10^7cfu/ml,备用(2)配nisin母液配0.02mol/l的 hcl溶液,和200ml容量瓶、烧杯,玻棒,250ml锥形瓶一起高温灭菌,称2gnisin粉末于灭菌的烧杯中,用hcl溶液溶解,然后转至200ml容量瓶定容,摇匀。

然后倒入烧杯中,利用ph计和naoh溶液调节ph,再转入250ml锥形瓶中保存,得到0.01g/ml(10000iu/ml)的nisin母液,于-21度保存备用。

(3)抑菌圈实验将单增李斯特菌液取100ul于bhi固体培养基平板中,均匀涂布。

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4. 研究创新点

本项目依托于国家肉品质量安全控制工程技术研究中心,使用已成熟的方法,研究Nisin对单增李斯特菌的抑制效果,研究Nisin在单增李斯特菌贮藏实验中的菌相变化,使用Baranyi模型,绘制单增李斯特菌抗Nisin的生长曲线,为食品安全检测和食品中致病菌的控制作出理论指导。

5. 研究计划与进展

2017年9-10月 与导师交流沟通,确定正确的研究思路,查阅相关文献,明确自身准备的缺陷和不足,确定实验中所需的知识储备和相应材料,查阅相关文献和预实验提出实验方案2017年11-2018年3月 进行Nisin的抑菌实验,找到其明显抑制单增李斯特菌的浓度2018年3-4月 进行贮藏实验,分析Nisin的不同浓度对单增李斯特菌的抑制作用2018年4-5月 整理试验结果与分析数据,撰写论文预期进展A.完成Nisin对单增李斯特菌的抑制实验,找到抑制单增李斯特菌最适浓度;B.进行单增李斯特菌与Nisin的贮藏实验,分析几种浓度对单增李斯特菌的影响,为食品生产应用打下基础。

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