一种新型纤维素酶的异源表达开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

意义

纤维素是地球上丰富廉价、年产量巨大的可再生资源。利用纤维素酶可以将纤维素物质水解成简单糖,进而发酵产生乙醇,从而解决农业、再生能源以及环境污染等问题。土壤微生物是纤维素酶类的重要来源，然而自然环境中99%以上的微生物在目前的实验条件下不可培养，限制了对微生物资源的利用。宏基因组学提供了解决不可培养问题的一个有效途径，通过直接提取样品总dna然后进行序列分析和功能筛选，省去了纯培养的过程，扩大了功能基因的来源。本课题旨在利用宏基因组技术发掘纤维素基因并表达出纤维素酶。

国内外研究概况

2. 研究的基本内容和问题

研究目标

筛选出纤维素酶活性的阳性克隆，将目的基因进行异源表达，获得具有纤维素酶活性的蛋白质。

内容

3. 研究的方法与方案

研究方法

取文库菌液涂布于含氨苄青霉素的纤维素酶筛选培养基平板上，筛选阳性克隆，抽提其质粒dna，进行测序分析，得到基因序列。将得到的目的基因建立重组质粒，转到宿主中进行表达,最后进行酶学性质表征。

技术路线

4. 研究创新点

使用宏基因组文库筛选方法，充分利用课题组构建的宏基因组 DNA 样本筛选资源库，获取更多具有价值的新纤维素酶。经异源表达、定向进化获得具有优良性状的纤维素酶，对于社会和经济将具有重要意义。

5. 研究计划与进展

研究计划

2016.10-12 纤维素酶活性的筛选

2016.1-2017.2 纤维素酶的异源表达