1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1.1本课题的意义
漆酶是一种含铜的多酚氧化酶，由于最早发现于漆树而得名，在真菌中分布最广，细菌中也存在，并且细菌漆酶较真菌漆酶有更多的优点。目前漆酶在食品工业、环境治理、生物检测、造纸工业等领域都有所应用。南京农业大学酶工程实验室从菌株fmb-820扩增获得漆酶基因fmb-l820，该重组漆酶除具有细菌漆酶的一般特性，还具有很好的耐热性。本课题拟探究该酶的快速纯化方法及条件，具体欲采用加热、硫酸铵沉降、镍柱层析等方法，并对纯化后的漆酶进行性质测定。另外，还将应用于成分复杂的玉米粉中，探究改性玉米粉的粉质特性及其应用。
1.2国内外研究概况
2. 研究的基本内容和问题
2.1研究的目标和内容
在前期的研究基础上，探索一种快速、简便的纯化本实验室重组漆酶的方法，根据该酶的特性，拟采用加热、硫酸铵沉降和镍柱层析等方法单一或协同纯化该酶。另外再测定纯化后的酶的最适温度、ph，酶抑制剂和金属离子对该酶的影响以及动力学常数。最后将该性质稳定的纯度较高的酶作用于玉米粉，进行色泽测定、全波长扫描等，初步测定改性玉米粉的性质，为拓宽漆酶在玉米粉中的应用打下基础。
2.2拟解决的关键问题
3. 研究的方法与方案
3.1技术路线
请见附件正文。
3.2实验方案
4. 研究创新点
漆酶在很多领域已有所应用，应用前景很广泛，细菌漆酶性能更为优质，而且该酶目前属于我院酶工程实验室重组酶。本研究课题创新之处主要在于探索一种快速、简便的方法来纯化该重组酶，加热、硫酸铵沉淀、镍柱层析等都是相对简便、高效的纯化方法，如应用于工业中，将大大节约成本。
5. 研究计划与进展
2015年9月-2015年10月初，熟悉实验环境和条件，学习发酵制备漆酶粗提液，学习跑电泳、测定酶活性和蛋白含量，学习生化基础知识；
2015年10月-2015年12月，先后采用加热、硫酸铵沉降以及镍柱层析等方法单一或协同作用来纯化漆酶，探索合适的纯化方法及条件；
2016年1月-2016年3月，测定纯化后的漆酶的性质，包括最适温度、ph、动力学常数以及酶抑制剂和金属离子对漆酶的影响；
