乳酸菌细菌素的分离纯化与抑菌效果的研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

课题意义：

细菌素(baeterioeins)是细菌在代谢过程中合成并分泌到环境中的一类对同种的或亲缘关系较近的种有抑制作用的杀菌蛋白或多肽物质，具有高效、无毒、耐高温、无残留、无抗药性等优点。其被广泛用于食品添加剂和饲料添加剂。细菌素作为饲料添加剂可以防止饲料本身被致病菌污染，防止致病菌对动物肠道的影响[1]。随着抗生素耐药性问题的加剧，细菌素将在人类疾病防治、动物医药保健及食品防腐等方面体现巨大的应用潜力。

国内外研究概况：

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

本研究的目的是以植物乳杆菌（lactobacillusplantarumjla-9）为研究对象，探究植物乳杆菌中产的细菌素的分离纯化技术及其抑菌能力的鉴定。本实验将lactobacillusplantarumjla-9的发酵上清液通过硫酸铵分级沉淀、sephadexlh-20纯化、r-hplc纯化将细菌素一步步分离纯化，并以枯草芽孢杆菌、多粘类芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜热脂肪地芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌为指示菌，通过其抑菌谱的研究鉴定植物乳杆菌（lactobacillusplantarumjla-9）细菌素的抑菌能力。

研究内容：

3. 研究的方法与方案

研究方法：

制备乳酸菌发酵液并一步步进行分离纯化，再以枯草芽孢杆菌、多粘类芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜热脂肪地芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌七种菌为指示菌，测定乳酸菌细菌素plantaricinjla-9对每种指示菌的抑菌能力。

技术路线：

4. 研究创新点

本实验所选乳酸菌为LactobacillusplantarumJla-9，通过各种文献可发现现在对于该种乳酸菌细菌素的纯化方法和抑菌能力的测定都比较少，对于该植物乳杆菌的抑菌能力的测定属于本实验的创新之处。

5. 研究计划与进展

本实验先于MRS培养基中培养乳酸菌LactobacillusplantarumJla-9，然后取发酵液上清液通过硫酸铵沉淀、SephadexLH-20纯化及R-HPLC纯化将细菌素样品纯度不断提高，最后以枯草芽孢杆菌、多粘类芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜热脂肪地芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌七种菌为指示菌，测定乳酸菌细菌素PlantaricinJla-9对每种指示菌的抑菌能力。

实验预计于5月上旬完成。