1. 研究目的与意义
【研究内容】重组人促性腺激素释放激素--绿脓杆菌外毒素a融合蛋白是一种新型的基因工程药物,对癌症这一疾病有特殊靶点结合的药物,能够有效的抑制癌细胞和杀死癌细胞,是一种很有效的治癌药物。
本篇论文介绍了重组人促性腺激素释放激素--绿脓杆菌外毒素a融合蛋白,大肠杆菌不可溶性的包涵体蛋白纯化工艺为课题,研究重组人促性腺激素释放激素--绿脓杆菌外毒素a融合蛋白纯化工艺。
【研究意义】当今社会,人人谈癌色变,癌症成为一个令人可怕的病症,世界平均每年近700万人因癌症而死亡。
2. 文献综述
文献综述重组人促性腺激素释放激素--绿脓杆菌外毒素a融合蛋白纯化工艺研究【摘 要】重组人促性腺激素释放激素--绿脓杆菌外毒素a融合蛋白是一种新型的基因工程药物,对癌症这一疾病有特殊靶点结合的药物,能够有效的抑制癌细胞和杀死癌细胞,是一种很有效的治癌药物。
【关键词】包涵体;洗涤;变性;纯化;复性【正文】 癌症,人人谈之色变,是危害人类健康的一大顽症,就单单在中国每年就平均高达90万以上的人死于此疾病[1]。
因此研究一种有效的药物来治疗癌症具有重大的意义。
3. 设计方案和技术路线
【研究方案】1. 文献查阅整理分析2. 菌体的破碎3. 包涵体的洗涤4. 蛋白的变性5. 初步纯化6. 目的蛋白的复性7. 进一步的纯化8. 整理统计数据【技术路线】高压破菌→离心→去上清→得包涵体→包涵体洗涤→包涵体溶解→Ni柱纯化→稀释复性→Ni柱回收→G25脱盐→酶切→Ni柱穿透→G25脱盐→DEAE柱浓缩→G25精制
4. 工作计划
2022.02.17--2022.03.31选题审议 2022.02.17--2022.03.31 论文开题 2022.03.20--2022.03.15确定实验方案 2022.04.01--2022.05.15进行实验 2022.05.16--2022.05.18 数据整理 2022.05.19--2022.06.30 论文答辩
5. 难点与创新点
重组人促性腺激素释放激素--绿脓杆菌外毒素A融合蛋白纯化采用了蛋白纯化系(AKTA Purifier 100 system),操作简便而且高效。
适用于纯化工艺摸索,纯化方法建立,蛋白药物主含量测定。
