松材线虫几丁质酶基因的克隆与原核表达分析开题报告

1. 研究目的与意义

由于松材线虫具有能进行体外活体培养的特性，在实验室中松材线虫取食灰霉等真菌。由于真菌的细胞壁的重要成分是几丁质，开展松材线虫几丁质酶等真菌细胞壁成分代谢相关基因的克隆与功能分析将有助于我们阐明松材线虫生活史关键阶段的取食与寄生机制，为有针对性开展松材线虫的致病机理研究及其有效的防治策略奠定基础。

2. 国内外研究现状分析

松材线虫病是由松材线虫（Bursaphelenchusxylophilus）引起一种松树毁灭性病害。日本1905年首次报道了该病引起松树大面积枯死以来，目前该病已在北美、欧洲和亚洲等地的部分国家广泛分布，其中以东亚的日本、韩国、中国受害最重。我国1982年首次在南京中山陵发现该病，现已逐渐在江苏、安徽、广东等17个省（自治区）的部分地区蔓延成灾，发生面积达10万hm2，累计致死松树3500多万株，直接经济损失25亿元，间接损失250亿元。近年来疫情扩散蔓延呈加剧之势，目前已逼近黄山等著名风景名胜区、世界自然文化遗产和重点生态区域，并已对我国大面积松林构成了严重威胁，是我国最具危险性的头号森林病虫害。但由于至今该病的入侵及其致病机制尚未十分清楚，对其治理也较为被动，目前生产上还缺乏有效的防治措施。

松材线虫对松树的危害方面的研究一直为人们所关注，目前，在治理防治技术方面已取得一系列成果，但在松材线虫生活史关键阶段的取食与寄生机制方面的研究鲜有报导。

3. 研究的基本内容与计划

主要研究内容包括：

（1）松材线虫几丁质酶基因的克隆与生物信息学分析

（2）松材线虫几丁质酶基因原核表达载体构建

4. 研究创新点

开展松材线虫几丁质酶等真菌细胞壁成分代谢相关基因的克隆与功能分析将有助于我们阐明松材线虫生活史关键阶段的取食与寄生机制，为有针对性开展松材线虫的致病机理研究及其有效的防治策略奠定基础。