基于HPLC-Q-TOF-MS的天冬化学成分分析文献综述

 2022-12-28 10:01:31

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

  1. 实验背景

二冬膏由天冬和麦冬组成(天冬:麦冬=1:1),是经典的滋阴润肺良方,常用于肺阴不足引起的燥咳痰少、痰中带血、鼻干咽痛等症状,具有祛痰、抗炎、免疫和滋阴抗肿瘤等方面的药理作用。其中天门冬为百合科 (Liliaceae)天门冬属 (As- paragus)植物天门冬 (Asparaguscochinchinensis (Lour.)Mer.)的干燥块根,别名天冬、明冬、大当门根。在我国主产于贵州、广西、云南等地, 是一种临床常用中药。

天冬始载于《神农本草经》,其性寒, 味甘,微苦, 归肺 、肾经, 是诸多经典名方的重要组成部分。在印度,天冬作为最为重要的草药和强壮剂,其常用于治疗神经紊乱、咽喉炎、催乳和绝经综合症、性功能衰退、消化不良、催欲助孕、肝病、肿瘤、结核、气管炎和全身虚弱等。现代药理学研究显示,天冬对免疫系统、呼吸系统、内分泌系统均有一定的作用,其多糖成分具有明显的抗肿瘤和抑菌抗炎作用。

在已知的研究报道[1]中,我们看到:第一,在进行体外试验[2]时,可以发现天门冬煎剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及黑曲霉有较强的抑制作用;在给大鼠服用天门冬粗提物的实验中[3]还发现其具有良好的抑制炎症的作用,可明显缩短急性炎症的持续时间,减轻症状。第二,多项研究显示了天门冬的有效成分之一天冬酰胺在镇咳平喘祛痰方面有巨大作用。对于由浓氨水引发咳嗽症状的小鼠,或者由组胺引发咳嗽的豚鼠,连续服用天门冬水提物可以看到咳嗽次数显著减少[4]。第三,在连续7天给小鼠服用天冬总多糖后进行低温游泳和常压缺氧实验[5],结果表明高剂量的总多糖能够增加小鼠在冰水中的游泳时间,提示天冬在增强非特异性免疫功能上的作用。第四,醇浓度为75%的天冬提取物在抑制溃疡形成上具有很强作用,张明发[6]等在研究中发现并提出天冬的抗炎作用与其抗腹泻作用的作用机制相同。第五,实验表明,天冬氨酸钾镁盐0.1mg/g对急性心肌缺血症有减轻作用[7],另有资料显示天门冬素可使外周血管明显扩张,血压降低,心收缩功能增强,心率减缓,排尿量增加,具有明显的强心作用。第六,现代药理学研究表明天门冬具有较强清除自由基功能,自由基具有极强的氧化性,而人体的衰老病变都与自由基的强氧化性有关。第七,在一系列的体外实验中[8],研究得知天冬所含的多糖成分一定程度上可以抑制急性淋巴细胞型白血病、慢性粒细胞型白血病和急性单核细胞型白血病患者的白细胞的脱氢酶,其提取物对小鼠肉瘤的抑制率高达40%,由此我们可以得知天冬具有抗肿瘤的作用。

此外,天冬还有一定的美容功效,据《本草纲目》记载,天冬汁液与淘米水混合洗脸,可使皮肤在原基础上变得更加细腻白皙。

目前使用的天冬以野生为主,而近年来,天冬的需求量逐年增加,野生资源也有所损耗。为了更加有效地利用天冬,其化学成分被广泛提取分离[9]。诸多学者对天冬的化学成分进行了广泛研究,从中分离提取出多种活性化合物,如天冬多糖、甾体皂苷、氨基酸、糠醛、黄酮、蒽醌、强心苷等,其中对天冬多糖、总皂苷、氨基酸的药理研究较为深入。

天冬多糖主要存在于天冬块根的细胞里,是由多个(gt;20)单糖组成的生物大分子,目前,其提取多采用浸提法:使用纯净水、稀酸、稀等作为浸提液,同时增加超声、微波、酶法等辅助手段;陈锡赟[10]等发现最优提取工艺为17倍天冬量浓度为81%的乙醇,在温度为83℃时,提取2.15h,连续提取两次,多糖的提取率为14.65%。对于天冬总皂苷的提取,刘梦迪[11]等发现最有提取条件为液料比1:50、48%乙醇、超声61min,提取率为5.07%;刘亮[12]等经过实验确定简单快捷的提取方法为液料比1:20、50%乙醇提取20min。氨基酸是水溶性成分,常用提取方法为水提法、醇提法;吴飞[13]等经过试验确定天冬中总氨基酸的最佳提取工艺为液料比1:80,在90℃,提取80min,提取率为3.37%。

  1. 实验目的和意义

目前采用HPLC-Q-TOF-MS对天冬化学成分的研究罕见报道,本课题旨在初步鉴定二冬膏中天冬的化学成分,以期为天冬的开发研究及生产应用、为二冬膏物质基础研究提供科学依据。

  1. 实验内容

1、仪器与器材

乙腈(色谱纯,Tedia,Fairfield,USA),甲醇(色谱纯,江苏永华化学科技有限公司),超纯水(哇哈哈,杭州哇哈哈有限集团公司),甲醇(分析纯,上海星可高纯溶剂有限公司),甲酸(分析纯,南京化学试剂有限公司)。

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