开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题的研究背景、意义和目的
新生抗原是指由突变的体细胞基因编码，经转录和翻译而成的具有特异性氨基酸序列改变的抗原肽。其具备如下几个特点：a. 肿瘤特异性，新生抗原只表达于肿瘤细胞。b.免疫原性，新生抗原可被机体免疫系统识别并引发相应的免疫反应。c.异质性，不同个体甚至同一个体的不同部位新生抗原的种类都存在差异。这些特点使新生抗原成为为免疫疗法的重要靶标。目前新生抗原已广泛应用于肿瘤疫苗、过继细胞疗法、免疫检查点抑制剂疗法以及免疫监测等多种免疫疗法的开发之中。
在多种免疫疗法中，肿瘤新生抗原疫苗可以发挥较强的抗肿瘤免疫活性且具有较好的安全性与可行性，有望成为第一个真正个性化的肿瘤治疗方式。新生抗原的免疫原性使其可以有效地打破机体免疫耐受，这是其被应用于肿瘤疫苗开发的重要原因。临床试验表明，新生抗原肿瘤疫苗不仅对恶性黑色素瘤有较好的治疗效果，还对延长胶质母细胞瘤患者的无进展生存期起到重要作用。目前，新生抗原相关肿瘤疫苗的开发仍存在一定挑战。首先由于只有小部分突变具有免疫原性，因此需要对患者体内出现的大量突变根据免疫原性进行筛选。现阶段，随着第二代测序技术的普及，虽然一系列的预测软件已经被开发出来，但其预测的准确性仍有待提高。其次由于大多数新生抗原是个别患者所特有的，这样，成功筛选出的新生抗原可能只能用于该患者的个性化治疗，这在一定程度上增加了治疗的成本与研发所用的时间。目前，研究人员试图寻找多患者共享的新抗原以制备“现成”疫苗，但有效的共享新抗原筛选方式仍有待研究。
泛DR表位PADRE是通过优化短聚丙氨酸基多肽构建的，由13个氨基酸构成的基序。以高亲和力与人群常见HLA-DR分子结合，被广泛用于表位肽肿瘤疫苗的开发。课题组在前期研究中将非天然氨基酸于关键位点引入至PADRE表位，成功构建了硝基化T细胞表位（NitraTh，其可以有效打破MHC II亚型限制，形成一种非自身的辅助性T细胞表位)，并证实其可以有效辅助HER2分子产生强效抗肿瘤效果。
因此本研究以期以NitraTh表位协助肿瘤新生抗原CD8表位，诱导机体免疫系统识别并靶向表达新生抗原的肿瘤细胞。利用小鼠模型检测相关疫苗免疫原性，以期对肿瘤新生抗原疫苗的设计起一定的指导性作用。
- 课题研究的主要内容
1. 硝基化T细胞表位的免疫原性研究。
2.利用免疫缺陷小鼠检测硝基化T细胞表位对新生抗原表位的辅助性作用。
研究难点
1、多肽疫苗有时难以合成，难以获取有效的候选疫苗分子是本课题的难点之一。
2、由于新生抗原的免疫原性与MHC分子分型，突变位点均有关系，如何验证疫苗的免疫原性是本课题的难点之一。
