拟研究或解决的问题：
我们将探讨IcarisideII对骨肉瘤细胞自噬溶酶体形成的影响。本实验从三部分进行研究：（1）IcarisideII对骨肉瘤细胞自噬体形成的影响；（2）IcarisideII对骨肉瘤细胞自噬流的影响；（3）IcarisideII对骨肉瘤细胞溶酶体的影响。本研究采用体内和体外实验相结合的方式，从整体、细胞与分子水平三个层次，探讨IcarisideII骨肉瘤细胞自噬溶酶体形成的影响，具有潜在的临床应用价值。
采用的研究手段：
Westernblot、转染、荧光拍照、细胞培养、流式细胞术等
文献综述：
淫羊藿为祖国传统中草药，性温，味辛，兼具补肾壮阳、祛风除湿之功效。现代药理研究表明，其有效成分为黄酮类化合物。从淫羊藿中提取的黄酮单体成份，淫羊藿次甙-2（IcarisideII）在多种恶性肿瘤细胞株上均取得较有意义的结果，如乳腺癌、前列腺癌、肝癌、子宫内膜癌、慢粒等。目前，IcarisideII对骨肉瘤细胞自噬溶酶体形成的尚不清楚，其如何抑制自噬溶酶体形成的作用机制未见报道。
人骨肉瘤是青少年时期最易发生的恶性肿瘤之一,其发生和发展的特点是易于转移以及原位复发。治疗骨肉瘤通常需要多种手段同时进行,包括手术切除,放疗以及药物化疗。在接受单独手术治疗的患者中,约有20%的病人因为肿瘤远处转移而仅仅获得较低的2年生存率。因此手术切除肿瘤合并术前以及术后的放疗合并化疗显得尤为重要。目前常用的化疗药物有顺铂、甲氨蝶呤、环磷酰胺、阿霉素等。虽然辅助化疗药物在一定程度上抑制了肿瘤的生长与转移,但不能忽略的是肿瘤细胞对其的的耐受作用继而导致的治疗效果降低。
自噬是一种高度保守的分解代谢过程，其关键在于正常维护细胞内环境稳定功能生长条件下和在压力下保留细胞活力。自噬在肿瘤发生中的作用是复杂的，可能组织和遗传背景依赖性。自噬与肿瘤细胞代谢之间的连接是十分有趣和高潜力的癌症研究临床相关性的话题，如代谢强调肿瘤细胞依靠自噬生存和新陈代谢的重新编程，以适应快速的细胞生长和增殖。与凋亡不同，自噬是被优先保留下来的。无论是肿瘤细胞还是正常细胞，保持一种基础、低水平的自噬活性是至关重要的。因为细胞中随时产生的垃圾（破损或衰老的细胞器、长寿命蛋白质、错误合成或折叠错误的蛋白质等等）都需要及时清除，而这主要靠自噬来完成，因此，自噬具有维持细胞自稳的功能。有文献报道，顺铂、甲氨蝶呤、环磷酰胺、阿霉素作用于骨肉瘤细胞后可以诱导自噬，抑制自噬可以增强化疗药物对于骨肉瘤细胞的药效。因此，基于细胞内自噬通路治疗肿瘤是目前对于抗骨肉瘤肿瘤药物研究的热点。
对溶酶体的认识已有60多年的历史，作为一种降解或再利用细胞内外成分的细胞器，它参与细胞膜上细胞表面分子与受体的调节以及在抵御细胞外侵害方面的作用已被广泛描述。溶酶体降解外源性的物质被称为异体吞噬（即吞噬细胞外的成分），相反，自噬（即吞噬细胞自身的成分）指的是在溶酶体降解细胞内成分。
在过去的十年中，应用实验模型，如基因操纵相对简单的果蝇、蠕虫（worms）和苍蝇，可以确定自噬的分子特点，并有助于理解它的生理学功能。细胞内成分被转运到溶酶体通路的不同是构成哺乳动物细胞内三种自噬差别的基础：大自噬、小自噬和分子伴侣介导的自噬(CMA)。不同的自噬有着共同的终点溶酶体，但靶底物、调节机制以及每一种被优先激活的条件不同。
