维生素E(Vitamin E)
维生素E是一种有8种形式的脂溶性维生素,为一重要的抗氧化剂。维生素E包括生育酚和三烯生育酚两类共8种化合物,即alpha;、beta;、gamma;、delta;生育酚和alpha;、beta;、gamma;、delta;三烯生育酚,alpha;-生育酚是自然界中分布最广泛含量最丰富活性最高的维生素E形式。 生育酚主要有四种衍生物,按甲基位置分为alpha;、beta;、gamma;和delta;四种。与生育酚相关的化合物生育三烯酚在取代基不同时活性是一定的,但生育酚的活性会明显降低。
易溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中,不溶于水,对热、酸稳定,对碱不稳定,对氧敏感,对热不敏感,但油炸时维生素E活性明显降低,原因为加速氧化。生育酚能促进性激素分泌,使男子精子活力和数量增加;使女子雌性激素浓度增高,提高生育能力,预防流产,还可用于防治男性不育症、烧伤、冻伤、毛细血管出血、更年期综合症、美容等方面。近来还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应,使末稍血管扩张,改善血液循环,预防近视发生和发展。 维生素E在胆酸、胰液和脂肪的存在时,在脂酶的作用下以混合微粒,在小肠上部经非饱和的被动弥散方式被肠上皮细胞吸收。各种形式的维生素E被吸收后大多由乳糜微粒携带经淋巴系统到达肝脏。肝脏中的维生素E通过乳糜微粒和极低密度脂蛋白(VLDL)的载体作用进入血浆。乳糜微粒在血循环的分解过程中,将吸收的维生素E转移进入脂蛋白循环,其他的作为乳糜微粒的残骸。alpha;-生育酚的主要氧化产物是alpha;-生育醌,在脱去含氢的醛基生成葡糖醛酸。葡糖醛酸可通过胆汁排泄,或进一步在肾脏中被降解产生alpha;-生育酸从尿酸中排泄。
本文将根据USP即美国药典,对维生素E含量测定的方法做出验证。
一、气相色谱法
气相色谱法是以气体为流动相的色谱方法。按检测柱不同,分为填充柱气相色谱法和毛细管气相色谱法。毛细管气相色谱法的特点:毛细管气相色谱法使用的是毛细管色谱柱,为气液色谱,材质为石英玻璃,长度在几十米甚至上百米,分离效果更好,柱效更高,但因内径过小(0.2-0.5mm),故柱容量也很小,且因材质因素,易折断损坏。因柱长较长,分析时间通常也比较长。而填充柱气相色谱法,充柱分离能力较差,柱效较低,但柱容量大,柱较短。
二、实验方法
1.溶液制备 内标溶液制备:取角鲨烷适量,加环己烷溶解并稀释成每毫升中含有10mg的溶液,摇匀作为内标溶液;生育酚醋酸酯ID溶液和生育酚ID溶液制备:分别称取生育酚醋酸酯USP RS 溶液和生育酚USP标准液至50ml容量瓶中,用环己烷溶液并稀释到刻度,混合均匀。标准液制备:称取适量生育酚USP标准液和生育酚USP RS solution至5ml容量瓶中,用内标液溶解并稀释到刻度,混合均匀;系统适应性溶液:分别称取适量生育酚USP RS溶液和生育酚醋酸酯USP RS溶液至50ml容量瓶中,用环己烷溶解并稀释到刻度,混合均匀。供试品的制备:称取样品溶液到5ml容量瓶中,共取六个,用内标液溶解并稀释到刻度,混合均匀。
2.色谱条件色谱柱:DB-1毛细管柱(30m0.25mmo.25m);载气(He);H2:Air=40:400ml/min;流速:1ml/min;柱温:280℃;进样口温度和检测器温度:290℃;分流比:500:1;进样量:1l;时间:15min。
