1. 研究目的与意义
姬松茸,又叫巴西蘑菇,原产巴西,秘鲁。它是一种夏秋生长的腐生菌,生活在高温、多湿、通风的环境中,具杏仁香味,口感脆嫩。姬松茸子实体粗壮,菌盖直径5~11厘米,初为半球形,逐渐成馒头形最后为平展,顶部中央平坦,表面有淡褐色至栗色的纤维状鳞片,盖缘有菌幕的碎片。
巴西蘑菇的神奇早在一九六o年就被巴西日裔移民古本隆寿发现,由于当地的居民疾病罹患率极低,古本隆寿推测是长期食用巴西蘑菇的结果,因此将这种菇菌引进日本,送到日本三重试岩出菌学研究所,请所长岩亥之助研究,后来经由多项实验证实确有抗癌、提升免疫力的效果,因而声名大燥。而且姬松茸能增强人体免疫功能:通过增强单核巨噬细胞系统功能,增强人体的自身免疫功能,具有抑制细胞分裂和调节免疫系统反应的作用,从而阻挠干扰病毒生长。姬松茸可促进人骨髓的造血功能:通过改善化疗对骨髓造血功能的抑制,使外周血红蛋白浓度、血小板及白细胞总数趋向正常值,同时对瘤细胞具有抑制作用,长期服用可固本安康。姬松茸可促进化疗药物环磷酰胺、 5-fu 的效果。姬松茸对干扰白血病的细胞增殖有抑制作用。生理活性多糖,适于治疗儿童白血病。姬松茸对肝、肾有保护作用,可长期服用。由于有以上的作用,姬松茸在日本引起保健界极大的关注。因有激活免疫与固本扶正的双重调理的特殊保健作用,所以在患者中广泛应用。姬松茸具有抗癌生物功能。中国医学肿瘤研究所免疫室研究员吴易元教授 :姬松茸是灵芝的近亲,一个更为神奇的菌种,目前在日本倍受瞩目。姬松茸双剑合壁具有多种生物功能,增强免疫系统功能,降血糖、降血脂、调节血压、改善肝功能、抗过敏反应等。它对肿瘤患者的护理作用尤令人关注,其抑肿瘤效果位居各药用真菌之首。
2. 研究内容和预期目标
一、不同碳源对菌丝体生长的影响实验:以菌丝萌发时间、菌丝日长速和菌丝密度为测量指标,通过单因子实验比较姬松茸菌丝体对不同碳源的利用情况,选择最适碳源。
二、不同氮源对菌丝体生长的影响实验:通过单因子实验比较姬松茸菌丝体对不同氮源的利用情况选择最适氮源,测量指标同上。
三、无机盐实验:通过单因子实验比较不同无机盐对菌丝体生长的作用,选择最适无机盐。
3. 研究的方法与步骤
一.斜面母种的活化(PDA培养基)
马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000mL,并定量分装,硫酸镁,维生素B1
二.碳源实验
确定基础培养基配方,在无碳培养基中分别添加等量的蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉、甘油,以无碳培养基为对照,定期观察测量,确定最适碳源
三.氮源实验
确定基础培养基配方,在无氮培养基中分别添加等量的(NH4)2SO4、NH4NO3、KNO3、蛋白胨、酵母膏、牛肉浸膏、尿素,以无氮培养基为对照,定期观察测量,确定最适氮源
三、无机盐实验:
通过单因子实验比较不同无机盐对菌丝体生长的作用,选择最适无机盐。
四.培养基的优化实验
通过以上实验得出最适碳源、最适氮源、最适无机盐,以四因素三水平的L9(34)
正交实验设计确定姬松茸培养基的最佳配方,分别以葡萄糖,KNO3,MgSO4.7H2O,KH2PO4为四因素,每个因素设三个水平(见表1),定期观察,通过该实验筛选出最佳碳、氮源的最适配比。
定期观察测量下列指标:
菌丝平均生长速度
菌丝形态
菌丝色泽
菌丝密度
表1 碳源、氮源、无机盐正交实验因素和水平
| 水平 | 葡萄糖 A(%) | KNO3 B(%) | MgSO4.7H20 C(%) | KH2PO4 D(%) |
| 1 2 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
| 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | |
| 3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
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五. 不同维生素对菌丝体生长的影响
通过单因子实验比较不同维生素(VB1、VB2、VB6、VC),以不含维生素为对照,对白灵菇蘑菌丝体生长的作用,定期观察测量。4. 参考文献
[ 1] 林杰.姬松茸栽培技术要点[ j] .中国食用菌, 2000 ,19(5):28 ~ 29.
[ 2] 陈忠纯.阿魏侧耳的栽培技术[ j] .干旱区研究, 1994 , 11(2): 65 ~ 68.
[ 3] 卯晓岚.中国大型真菌[ m] .郑州:河南科学技术出版社, 2000:64 ~ 66.
5. 计划与进度安排
第3周前:查阅相关文献资料并设计实验方案,完成开题报告;
第4~5周:查阅参考文献,并进行实验的前期准备工作;
第6~8周:菌种活化;
