不同来源半乳糖苷水解酶催化活性研究开题报告

 2021-08-08 16:43:45

1. 研究目的与意义

1.研究目的及意义糖苷酶即糖苷水解酶,是一类水解糖苷键的酶,在生物体糖和糖缀合物的水解与合成过程中扮演着重要角色。

而酶法糖基化具有高度的区域及立体专一性,能够实现高选择性的糖苷化合物的合成。

这类酶包含糖基转移酶和糖苷水解酶,糖基转移酶以核苷磷酸糖基为供体(例如udp-glu)转移糖基至受体上,由于活化糖基价格昂贵而限制了该酶在糖苷化合物大规模制造中的应用。

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2. 国内外研究现状分析

2.文献综述2.1β-半乳糖苷酶概述β-半乳糖苷酶(ec.3.2.1.23)又称乳糖酶,广泛存在于动物、植物和微生物中,它能水解乳糖生成半乳糖和葡萄糖。

某些种类的β-半乳糖苷酶在水解乳糖分子中β-1,4半乳糖苷键的同时,还具有转半乳糖基作用,以乳糖或其水解产物半乳糖和葡萄糖为糖基受体,合成半乳糖苷键,生成低聚半乳糖[1]。

不同微生物来源的β-半乳糖苷酶的水解活性和半乳糖基转移活性的比例不同。

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3. 研究的基本内容与计划

3. 研究内容及计划3.1 研究内容(1)乳酸发酵菌株半乳糖苷酶的挖掘和高效表达。

(2)建立半乳糖糖苷酶的三维结构模型。

(3)半乳糖苷酶酶学性质表征。

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4. 研究创新点

4. 特色与创新本研究异源表达来自保加利亚乳杆菌及凝结芽孢杆菌来源的β-半乳糖苷酶,通过酶学性质研究考察其在水解和转糖基活性的差异,在此基础上基于同源建模和结构比较探讨影响β-半乳糖苷酶转糖基活性的结构因素和关键氨基酸残基,项目的完成不仅可以为β-半乳糖苷酶转糖基机制的基础研究奠定了理论基础,还可为β-半乳糖苷酶的生产及改造提供参考,具有较强的应用价值。

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