瑞氏木霉表达内切型木聚糖酶基因enXy-3的研究开题报告

1. 研究目的与意义

内切木聚糖酶能够用于木糖或低聚木糖的制备，其在生物能源、保健和饲料等行业中具有重要的利用价值。

课题组前期分离获得了两个耐热型木聚糖酶的编码基因。

本课题旨在利用里氏木霉高表达新型木聚糖酶基因，以有效获得耐热木聚糖酶，并研究其酶解麦麸制备低聚糖中重要参数。

2. 国内外研究现状分析

木聚糖酶(endo-1,4-β-d-xylanxylanohydrolaseec3121118)以内切方式作用于木聚糖分子中β21,42木糖苷键,其主要水解产物为木二糖与木二糖以上的低聚木糖,还有少量木糖和阿拉伯糖。

木聚糖酶的测定方法通常有dns法,somogyi-nelson法和rbb-xylan(remazolbrilliantbluer-d-xylan)法,前两种方法是基于测定酶反应后所释放出的还原糖量,第三种方法是基于从rbb-xylan中释放出的染色碎片来测定。

木聚糖酶的纯化一般采用以下几个步骤:样品的预处理;盐析;离子交换色谱和凝胶色谱。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容（1）里氏木霉遗传重组菌株的构建，及高产菌株筛选；（2）重组里氏木霉的固态发酵条件研究，包括培养基成分等参数的优化；（3）利用发酵获得的木聚糖酶酶解麸皮获得低聚木糖。

研究计划1、文献查阅及资料收集：1周11 2、里氏木霉遗传重组菌株的构建，及高产菌株筛选：2-4周3、固态发酵条件研究，培养基配制和发酵条件优化：5-8周4、发酵获得的木聚糖酶酶解麸皮获得低聚木糖：9-14周5、数据整理与论文撰写：15-16周

4. 研究创新点

本课题选取具高温催化性能的新型木聚糖酶基因作为研究对象，并以瑞氏木霉作为表达宿主，能够高效、低成本的制备木聚糖酶。

项目选题具有一定的新颖性。