1. 研究目的与意义
人参皂苷Rd在对心脑血管、神经免疫方面疾病具有独特的作用，其植物来源的含量较低，远不能满足生命医疗领域的需求，其结构复杂合成困难，产生同源异构体多难以分离，因此一种高效定向地生成人参皂苷Rd的方法值得探索。
但是，目前国内外定向水解生成人参皂苷Rd的糖苷酶主要源于常规菌株，在嗜热菌来源的耐高温的糖苷酶的研究较少，在高温条件下限制了对人参皂苷Rb2的转化，因此本课题通过基因工程技术获得耐高温的半乳糖苷酶有望在较高温条件下应用与人参皂苷Rb2的转化利用。
2. 国内外研究现状分析
人参皂苷rd在对心脑血管、神经免疫方面疾病具有独特的作用，其植物来源的含量较低，远不能满足生命医疗领域的需求，其结构复杂合成困难，产生同源异构体多难以分离，因此高效和定向制备人参皂苷rd的方法值得探索。
糖苷酶多数能水解人参皂苷rb1，其水解产物主要为rd，此外还有可将rg3水解生成rh2的糖苷酶，对可以选择性水解人参皂苷rc转化为相应稀有皂苷的糖苷酶的研究报道很少。
zhang等从人参根中分离纯化出1种可将rc水解生成rd的α-阿拉伯糖苷酶目前已知rb1在人和大鼠肠道中的代谢通路：rb1→ginsenoide rd→ginsenoside f2(g-f2) →compound k(c-k) →20(s)protopanaxadiol(ppd)。
3. 研究的基本内容与计划
1. 克隆、表达半乳糖苷酶tpet1557，进行单因素条件优化，在最优培养条件下表达产酶。
2. 测定半乳糖苷酶tpet1557的酶学性质：最适温度、最适ph、温度稳定性、ph稳定性、比较双功能酶对人工底物的高浓度的耐受性、对有机溶剂、乳糖、半乳糖、阿拉伯糖的耐受力等性质。
3.探究半乳糖苷酶tpet1557对生物活性物质的转化。
4. 研究创新点
克隆表达来源于糖苷水解酶家族GH42的蛋白Tpet1557，它属于具有半乳糖苷酶和阿拉伯吡喃糖苷酶活性的双功能半乳糖苷酶，并成功将其应用于转化人参皂苷Rb制备Rd的生物转化工艺中。
