1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
多种食源性细菌具有形成生物被膜的能力。这些食源性腐败菌和致病菌一旦在食品或食品接触面上形成生物被膜，它们就具有更强的适应性和抵抗力。这使常规的抑菌、杀菌、清洗和消毒措施失去应有效果；进而更容易导致食品腐败和食源性疾病的发生，还会导致食品设备的清洗困难、腐蚀、传热传质受影响等多种危害[1-3]。这些危害在肉制品[4,5]、乳制品[6,7]、禽肉、水产品和即食食品等[8]多类食品工业中都引起了广泛关注。
冷却肉在我国的消费量很高，但冷却肉在分割过程中比表面积逐渐增大，在加工和陈列销售过程中与多种接触面接触，容易被自身和接触面上的细菌污染而腐败。在冷却肉的腐败过程中，假单胞菌（pseudomonas spp）始终是优势腐败菌[9,10]；这可能与其较强的竞争能力和低温适应性有关[11,12]。此外，假单胞菌属的多种细菌能够形成生物被膜[13]，也能够在食品或食品接触面上形成生物被膜[4,14]，这有利于其黏附、适应环境并成为优势腐败菌。其中，荧光假单胞菌（pseudomonas fluorescens）是冷却肉类最主要的腐败菌之一[10,15]，具有较强的生物被膜能力，而且不同来源的荧光假单胞菌生物被膜形成能力差别较大 [16,17]。尽管荧光假单胞菌的生物被膜已有较多研究，但食源性荧光假单胞菌的生物被膜研究仍然不多，且多数集中在牛奶中的荧光假单胞菌[18]。
沙门氏菌氏成为全球范围内危害么众健康最主要的食源性致病菌，其毎年都会引起多起食物中毒事件，并导致大批食品被召回，这对消费者和食品加工业造成了潜在的巨大危害和经济损失；沙门氏菌在食品加工接触表面巧成的生物菌膜可引发大范困的交叉污染，由该菌生物菌膜引发的多起食物中毒案例己被证实确认；研究沙门氏菌生物菌膜的形成，对寻求针对性控制沙门氏菌生物菌膜的技术策略具有重要意义。鉴于沙口氏菌的高污染率和强危害性，该菌在食品加工接触表面的生物菌膜形成性能受到了很多学者的密切关注。目前国际上在食品科学范围内关于沙门氏菌生物菌膜的研究主要集中在以下4大方面：菌株血清型和分离源对生物菌膜的影响、生长环、境因素对生物菌膜的影响、生物菌膜微观结构表征和生物菌膜的清除控制策略，而国内对该菌生物菌膜的研究基本处于空白状态[19]。
2. 研究的基本内容和问题
本实验主要确定沙门氏菌、荧光假单胞菌分别单独培养及这两种菌混合培养形成生物菌膜的时间，形成的生物菌膜用强酸性电解水和微酸性电解水处理不同时间，分析各自的耐受特性并比较单一菌种生成的生物菌膜和混合生物菌膜耐受特性。
实验内容主要有两部分组成，第一部分探究生物菌膜的形成时间，将沙门氏菌和荧光假单胞菌调整到合适的菌浓度分别并混合接入tsb培养基中，是最终菌浓度相同，放入不锈钢片进行培养，每天涂布计数钢片上黏附生长的菌落数，连续测定10天。第二部分进行生物菌膜耐受性的实验，分别用强酸性电解水和微酸性电解水对成熟的生物菌膜进行处理，处理时间分别为0min，3min，5min，10min，15min，20min，25min，30min，再对处理后的钢片上黏附得剩余的菌落进行涂布计数，分析耐受性。
本实验拟解决的关键问题主要有确定生物菌膜的形成时间，对单菌生物菌膜和混合生物菌膜的耐受性进行分析和比较。
3. 研究的方法与方案
研究方法主要利用微生物操作对微生物进行液体培养和涂布培养。
技术路线见附件
实验的可行性分析：本实验主要操作均为微生物基本操作，工作量稍大，可行性强。
4. 研究创新点
本实验选用典型食源性致病菌沙门氏菌和优势腐败菌荧光假单胞菌进行生物菌膜形成及耐受性实验，将对两种单一菌种形成的生物菌膜和一种混合生物菌膜形成及其对弱酸性电解水和强酸性电解水的耐受特性进行探究。目前关于生物菌膜方面的研究并不多，而混合生物菌膜的研究更鲜有报道。此外，电解水作为杀菌剂，有其诸多优势，使其在食品安全领域具有广阔的应用前景。
5. 研究计划与进展
2017年3月：进行生物菌膜形成实验
2017年4月：电解水处理成熟生物菌膜，制作杀菌曲线并分析比较耐受性
2017年5月：数据处理及结题
