1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题的意义、国内外研究概况、应用前景
糖组学是研究糖链组成及其功能的一门新学科,近年来备受关注。近几年,随着人们对糖类物质研究的不断深入,发现糖链作为生物信息分子参与了生物体几乎所有的生命过程,特别是在细胞分化、发育、免疫、老化、癌变、信息传递等生命和疾病过程中起着特异性的识别、介导与调控作用。糖组学的研究与基因组学类似,并且糖组学是与所有生物领域密切相关的学科。然而,由于糖链结构的复杂性,相比于蛋白质的广泛研究,糖链的研究明显滞后。目前阶段还不能在完整糖蛋白的水平上对糖链的详细结构信息进行研究,而需先从多肽骨架上释放寡糖链,再进一步研究糖链结构与功能的关系。因此多糖分析的过程是复杂的,尤其是对肌肉资源。此次,本文综述了猪肌肉组织n-糖链糖组的释放以及简单的结构分析。
主要参考文献:
2. 研究的基本内容和问题
1研究目标
以猪的肉(或肝、肾)组织中的糖蛋白为研究对象,以uhplc-esi-ms为主要技术方法对其糖链结构进行分离和结构鉴定,建立起一种动物源糖蛋白糖链提取及结构分析方法,为其它动物组织中(如小鼠)糖蛋白糖链的分析研究提供参考。通过此项目的研究,参与者将了解并熟悉一定的糖生物学及其相关领域的知识,掌握糖分子结构分析的基本研究方法,更有利于以后的学习和工作。
2研究内容
3. 研究的方法与方案
1拟采取的研究方法
利用猪肉(或肝、肾)为实验对象,采用酶法和化学法获取其n-糖链和o-糖链,并用2-氨基芘啶对其荧光衍生,最后采用uhplc-esi-ms鉴定其结构。
2技术路线
4. 研究创新点
本项目的创新之处
与HPLC相比,UHPLC具有更快的分析速度、更好的分离度和更高的灵敏度。本课题采用UHPLC对来源于猪心(或肝、肾)脏组织糖蛋白糖链的分离,并与ESI-MS联用,将进一步拓展UHPLC在糖链分离分析方面的应用,为后续糖链生物学功能的研究以及其它动物源糖蛋白的分析提供参考。
5. 研究计划与进展
研究计划
(1)进行资料查询,与导师确定实验方案。(2015年3月)
(2)进行预实验(2015年3月-2015年4月)
