来源于Caldicellulosiruptor saccharolyticus木糖苷酶的克隆表达及定性研究开题报告

1. 研究目的与意义

目的：来源于极端嗜热菌木糖苷酶在大肠杆菌系统进行异源表达及定性研究，先获得大量高温重组酶，通过亲和ni2 柱获得纯酶，然后对纯酶进行性质测定。

从而为进一步探索高温酶在木质纤维工业上的降解应用打下较好的基础。

意义：半纤维素是世界上第二丰富的可再生木质纤维素生物质资源。

2. 国内外研究现状分析

近年来国外对β-木糖苷酶的研究已日趋深入，而国内相关研究仍然报道甚少。

尽管来源于植物、真菌和细菌中的常温或中温的 β-木糖苷酶被克隆且进行了相关酶学性质研究，但是在数据库中，关于极耐热的 β-木糖苷酶的文献却少之又少。

而在生物质转化应用方面，为了增加酶的使用寿命以及减少它的消耗量，β-木糖苷酶具有的高热稳定性是至关重要的。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容： 1.利用DNAMAN软件设计引物，摸索PCR的条件 2.构建重组质粒并测序 3.木糖苷酶的表达与纯化 4.木糖苷酶的酶学性质研究 5.木糖苷酶催化低聚木糖，分析其水解产物计划： 2015.12-2016.1 查阅文献，准备开题报告 2016.3-2016.5中旬 实验 2016.5下旬-2016.6上旬 撰写论文、答辩

4. 研究创新点

嗜热酶因其具有很高的热稳定性，因而在高温条件下能够有效降解低聚木聚糖。