来源于海栖热袍菌的极耐热葡聚糖酶cel12B定点突变研究开题报告

1. 研究目的与意义

目的：运用定点突变手段对极耐热葡聚糖酶Cell 2B的原始基因进行改造，并和原始基因在大肠杆菌中表达情况进行对比，找出影响该酶表达量和表达活力的主要因素。

2. 国内外研究现状分析

海栖热袍菌是嗜极端高温的厌氧细菌，其产生的极耐热葡聚糖酶具有很好的热稳定性和潜在的可观工业用途，国内外均已有相关方面的研究及相关文献资料报道，极耐热葡聚糖酶的基因工程研究进一步促进了结晶纤维素的生物转化讲解领域的发展。

3. 研究的基本内容与计划

内容：本研究拟采用来源于海栖热袍菌的极耐热葡聚糖酶cell 2b进行研究，以此进行定点突变和重组表达，并和原始基因在大肠杆菌中表达情况进行对比，找出影响该酶表达量和表达活力的主要因素。为进一步探索体外合成葡聚糖酶在工业生物催化水解纤维素领域的应用打下较好的基础。

计划：

2012.02.21~2012.02.26 查阅文献，了解实验背景及原理

4. 研究创新点

本研究拟采用海栖热袍菌产生的极耐热葡聚糖酶Cell 2B进行定点突变，选择繁殖周期短的大肠杆菌作为感受态细胞进行重组质粒的诱导表达，采用CMC（羟甲基纤维素钠）作为分解底物的酶活检测方法，确定其酶学特性。

本研究在内切葡聚糖酶降解纤维素领域具有广泛的市场前景。