来源于巨大芽孢杆菌的细胞色素P450 BM3在大肠杆菌中的表达研究开题报告

1. 研究目的与意义

找出影响细胞色素P450BM-3表达量和表达活力的主要因素，进一步探索体外合成的细胞色素P450BM-3进行生物催化应用打下较好的基础。

2. 国内外研究现状分析

细胞色素P450BM-3，又称CYP102，是来自于巨大芽孢杆菌的具有脂肪酸羟基化活性的P450单加氧酶，最早由Miura和Fulco从巨大芽孢杆菌中分离出来并确定为细胞色素P450酶系的第Ⅱ类酶。

1987年Narhi等将编码P450BM-3的基因克隆出来，并在大肠杆菌中进行了表达，经纯化后发现与从巨大芽孢杆菌中纯化得到的 P450BM-3具有相同的催化功能、免疫化学和电泳特征，而且测序结果表明其N末端的序列也一致，说明将 P450BM-3的基因克隆到基因工程菌中是能够正确表达 P450BM-3酶蛋白的。

3. 研究的基本内容与计划

本研究拟采用来源于巨大芽孢杆菌的细胞色素p450bm-3在大肠杆菌中进行重组表达，为进一步探索体外合成的细胞色素p450bm-3进行生物催化应用打下较好的基础。

研究内容：

1. 通过pcr方法从巨大芽孢杆菌b350中获取细胞色素单加氧酶的基因。

4. 研究创新点

在大肠杆菌中正确表达P450BM-3的基因的基础上，找出影响细胞色素P450BM-3表达量和表达活力的主要因素。