1. 研究目的与意义
寻求高效的微生物纤维素酶以水解农林纤维素废弃物是国内外聚焦的研究热点。然而，由于木质纤维资源本身的结构特点，实现酶解糖化和发酵前需要对其进行适当的预处理。离子液体作为“绿色、可设计”的溶剂，在预处理农林纤维资源方面较其它方法具有某些显著的优势，国内外研究者已在探索离子液体系中纤维素原位酶解方面做了大量的工作。
本课题组对于类芽胞杆菌llz1（paenibacillus sp. llz1）纤维酶在离子液体中的失活机理和强化过程方面的问题开展了系统的研究。目前还亟需解决的瓶颈问题为：从基因水平分析该酶的组成，研究其主要组分，为开发能够承接离子液体预处理过程的纤维素酶水解过程铺垫基础。因此，本研究拟从分析该野生型酶的组成开始，对其主要组分进行异源表达。提高纤维素酶在离子液体环境中对甘蔗渣生物质的糖化效率，可以有效地降低该过程的成本，使其接近实用化，从而开发能够在离子液体环境中高效糖化的生物催化剂，为酶促木质纤维素糖化的产业化做出贡献。
2. 研究内容和预期目标
本实验主要内容可以分为以下几个部分：
1 对野生型菌种进行活力验证；
3. 研究的方法与步骤
1 总dna提取
首先提取类芽孢杆菌的基因组dna：挑取单菌落至含有丰富培养基的试管中培养24，离心收集菌体并洗涤两次。按照说明使用细菌基因组dna提取试剂盒对目标菌的基因组dna进行提取。
2 目的基因扩增
实验步骤如下：将得到的基因组dna通过琼脂糖电泳进行验证。如果大小正确，则以基因组dna为模板，通过生物信息学分析其可能存在的序列，通过基因数据库分析，初步设计的引物进行扩增，引物的序列为：
4. 参考文献
1 张树政等. 酶制剂工业 (下册) .北京: 科学出版社 ,第一版 , 1984年 , 741.
2 maith ri m k , jayasekera et al.enhancement of catalytic activity by gene truncation activation ofl-aspartase from escherichia coli. b.r.c. 1997 , 238- 411.
3 林应锐 . 阿斯巴甜的生物合成[j]. 微生物学通报，1992，19 (4) : 226 -229.
5. 计划与进度安排
1 2022 11-2022 12 查阅文献，撰写开题报告和前言
22022 12-2022 02 大肠杆菌中克隆并表达来自类芽孢杆菌llz1纤维素酶
32022 03-2022 04 对获得的蛋白（以细胞破碎液的形式）利用天冬氨酸进行活力鉴定
