1. 研究目的与意义
研究背景
众所周知，中国不仅是个人口大国更是个农业大国，如今解决粮食生产、储备等问题至关重要。而传统的化学农药对现代农业的增产增收起到了决定性的作用，但是长期以来一直依赖化学农药也带来了很多的生态、环境等方面的问题。随着杀虫效果的减弱，农作植物的收成受到很大影响。
新型的微生物源杀虫剂多杀菌素是由放线菌刺糖多孢菌经有氧发酵后产生的一种胞内次级代谢产物。因其对农业害虫有着极好的杀虫效果，而对哺乳动物、鱼类、鸟类和大多数益虫具有极高的安全界限，兼具化学农药的高效性与生物农药的安全性，正成为最具有发展前景的新一代杀虫剂。但其产量地下，且发酵周期长达二至三周，是的生产成本极高，严重制约了其生产及实际应用。因此，进行菌种改良，一尽可能地提高多杀菌素产量，成为了开发该种杀虫剂最迫切需要解决的问题之一。
2. 研究内容和预期目标
主要研究内容：
本研究立足于国内外研究现状，以白色放线菌刺糖多孢菌为生产菌，对刺糖多孢菌进行抗性筛选及紫外诱变处理，使菌体在发酵时能最大限度地提高多杀菌素的产量，具体研究内容如下：
1） 制作不同浓度梯度的鼠李糖抗性平板，观察计数平板上的菌落数，确定合适的抗性浓度。
3. 研究的方法与步骤
1）将自然筛选获得的菌株制成甘油管保存，甘油管接种到平板上进行活化处理，于28℃恒温培养7-10天。
2）制作不同浓度的鼠李糖抗性平板，制备菌悬液，稀释8次，取0.1 ml涂平板，于28℃恒温培养7-10天，观察并记录菌落生长情况，确定抗性平板浓度。
3）制作不同浓度的链霉素抗性平板，制备菌悬液，稀释8次，取0.1 ml涂平板，于28℃恒温培养7-10天，观察并记录菌落生长情况，确定抗性平板浓度。
4. 参考文献
[1]huang y , zhang x , zhao c , et al. improvement of spinosad production upon utilization of oils and manipulation of β-oxidation in a high-producing saccharopolyspora spinosa strain.[j]. j mol microbiol biotechnol, 2018, 28(2):53-64.
[2]tong q q , zhou y h , chen x s , et al. genome shuffling and ribosome engineering of streptomyces virginiae for improved virginiamycin production[j]. bioprocess and biosystems engineering, 2018.
[3]tao, h., et al., strategies for enhancing the yield of the potent insecticide spinosad in actinomycetes. biotechnology journal, 2018: p. 1700769.
5. 计划与进度安排
（1）2022-2022-1学期17-20周~2022-2022-2学期第1周~第2周（2022-12-25~2022-3-16）：查阅资料，准备开题报告，外文论文翻译；培养基制备与菌种的活化；
（2）第3周~第6周（2022-3-19~4-13）：抗性平板中红霉素和安普霉素浓度的确定。
（3）第7周~第11周（2022-4-16~5-18）：紫外诱变和亚硝基胍诱变时间确定，进行抗性复合诱变。
