1. 研究目的与意义
蛋氨酸广泛用于医药、食品、饲料和化妆品等领域，其中饲料添加剂的用量最大。随着我国经济的发展，人们生活水平的提高，对肉、蛋、奶、皮毛的需求量增加很快，我国的畜牧业、饲料业呈高速发展势头，极大带动了饲料业的发展。近年来，国内外市场对蛋氨酸的需求逐年增长。特别是国内市场，多年来国产饲料用蛋氨酸远远不能满足市场需求，每年都要从国外大量进口，现已成为我国化学原料药进口的大宗产品，连续数年进口量达数万吨，进口额过亿美元。预计今后国内外市场对氨基酸的需求量还将以较大的比率增长，短期内国内市场供需矛盾无法解决，还需要大量进口。
本次实验室筛选出en34菌株，但蛋氨酸产量不高，为提高产量，采用基因工程的方法对此菌进行改造。蛋氨酸是构成蛋白质的基本单位之一，是必需氨基酸中惟一含有硫的氨基酸。蛋氨酸无法在动物体内合成，需从食物中获得，因此蛋氨酸代谢过程中，需要提供硫源。硫源的提供除了从半胱氨酸代谢通路中获得，还可以直接吸收培养基中的硫酸盐，通过一系列代谢通路合成蛋氨酸。为接下来我国提高蛋氨酸产量的研究提供基础。
本次试验也将检验我在大学本科四年所学的相关实验理论知识和操作技能，将理论和实践有效结合。从实验准备（文献搜集、外文文献翻译）、实验操作、到实验结果的收集和分析将由我高效率地应对和解决相关问题。
2. 研究内容和预期目标
实验室筛出出EN34菌株，但蛋氨酸产量不高，为提高产量，采用基因工程的方法对此菌进行改造。蛋氨酸代谢过程中，需要提供硫源。硫源的提供除了从半胱氨酸代谢通路中获得，还可以直接吸收培养基中的硫酸盐，通过一系列代谢通路合成蛋氨酸。本次实验的目的是分别对硫源代谢通路中的一系列催化酶相应的基因加强表达，判断其对蛋氨酸产量的影响。
3. 研究的方法与步骤
本实验步骤如下：
1）s代谢通路中各基因引物的设置；
利用kegg pathway网站获取基因序列，通过mega软件比对，设计此基因扩增的引物。
4. 参考文献
[1] 英军, 张卓标, 吕海龙. 我国蛋氨酸生产现状及市场分析[j]. 精细与专用化学品, 2005, 13(16):22-24.
[2] 高文亮, 李林凤, 张静静等. 蛋氨酸生产工艺及核心制备技术研究进展[j]. 化工进展, 2012, 31(4):866-872.
[3] 党万利, 金利群, 郑裕国等. 蛋氨酸生产工艺研究进展[j]. 食品与发酵工业, 2012, 38(4):152-158.
5. 计划与进度安排
1)2022-2022-1学期第11-19周-2022-2022-2学期第2周（2022.11.12-2022.03.10） 完成翻译，s代谢通路中各基因引物的设置与合成，菌种活化；
2)第3-5周（2022.03.11-2022.03.31）扩增en34中各个基因序列；
3)第6-7周（2022.04.01-2022.04.14 ）通过重组连接的方式将各个基因连接到表达载体中；
