1. 研究目的与意义
研究背景：在全球化石资源逐渐面临枯竭，环境问题日益突出的严峻形势下，采用酶法将木质纤维材料转化为可生物利用的糖，从而制备清洁和可持续的生物燃料已成为研究热点。目前离子液体作为一种“绿色可设计溶剂”，已经成功运用于纤维素的预处理溶解与加工过程。特别地，将纤维素、离子液体和酶进行“一锅”处理的原位酶解策略备受关注。对于如何组成高效协同的纤维素酶实现高效率的原位酶解，是迫切需要探索的问题。
研究目的：探究不同底物产生的纤维素酶的酶活高低，选取出其中酶活最高的底物，将其作为最佳底物进行后续研究；研究不同离子液体以及不同浓度的离子液体对于酶活的影响程度的大小，探究离子液体中多样性的纤维素酶的不稳定机制，力求对催化过程酶的稳定性进行强化改善，减少离子液体对纤维素酶的影响，增强纤维素酶在离子液体里的稳定性。
研究意义：充分利用纤维素这种量大又便宜的生物资源，发挥生物资源的绿色环保功能，以减少化石能源的利用，能减轻能源负担和环境压力，具有重要的经济意义和社会效益。在最佳底物下培养纤维素酶，提高纤维素酶在离子液体中的耐受性，减少离子液体对纤维素酶的强烈抑制效果，增加纤维素酶在离子液体里面的酶活，增加纤维素的原位酶解的效率。
2. 研究内容和预期目标
本项目拟针对课题组已有的类芽孢杆菌sp.llz1，开展其β-葡萄糖苷酶在离子液体中的失活与增强的相关研究。
主要研究内容：
（1）研究分析利用不同碳源培养的β-葡萄糖苷酶的酶活高低；
3. 研究的方法与步骤
1) 一，测定利用不同碳源培养的β-葡萄糖苷酶的酶活
分别使用不同的碳源（mcc、淀粉、纤维二糖、甘油、cmc-na）的培养基来培养类芽孢杆菌sp.llz1，用pnpg法对获得的粗酶液测定β-葡萄糖苷酶的酶活。
步骤：
4. 参考文献
1. xu j,wang x,hu l,xia j,wu z,xu n, dai b,wu b. anovelionicliquid-tolerantfusariumoxysporumbnsecretingionicliquid-stablecellulase:consolidatedbioprocessingofpretreatedlignocellulosecontainingresidualionicliquid. bioresour technol.2015, 181, 18-25.
2. raddadi n,cherif a,daffonchio d,fava f. halo-alkalitolerant and thermostable cellulases with improved tolerance to ionic liquids and organic solvents from paenibacillus tarimensis isolated from the chott el fejej, sahara desert, tunisia. bioresour technol.2013, 150, 121-128.
3. gastelum-arellanez a,paredes-lópez o, olalde-portugal v. extracellular endoglucanase activity from paenibacillus polymyxa beb-40: production, optimization and enzymatic characterization. world j microbiol biotechnol.2014 , 30, 2953-2965.
4. liao h, li s,wei z,shen q,xu y. insights into high-efficiency lignocellulolytic enzyme production by penicillium oxalicum gz-2 induced by a complex substrate. biotechnol biofuels.2014, 7, 162.
5. engel p,krull s,seiferheld b,spiess ac. rational approach to optimize cellulase mixtures for hydrolysis of regenerated cellulose containing residual ionic liquid. bioresour technol.2012, 115, 27-34.
5. 计划与进度安排
具体实验进度安排如下：
（1）2022-2022-1学期17-20周~2022-2022-2学期第3周~第4周（2022-12-25~2022-3-23）
搜集的资料、调查的数据并进行整理分析，总结归纳β-葡萄糖苷酶在不同浓度的离子液体中的酶活的问题。借助网络资源、查阅相关书籍资料设计实验操作方法，翻译英文文献。
