人参内生菌中单胞杆菌的分离开题报告

 2022-02-17 20:46:02

1. 研究目的与意义

癌症严重危害人类的健康,长期以来,虽然大量的抗肿瘤药物问世,但癌症的复发率、死亡率以及药物耐药性依然居高不下。近年来,随着靶向药物的问世,给广大癌症患者带来了新希望。但是,目前问世的靶向药物往往价格高昂,难以为广大人们群众所承受。人参属于五加科人参属,是传统名贵中药。人参在我国有2000多年的药用历史,其对中枢神经系统、心血管系统、消化系统、免疫系统、炎症、肿瘤等有广泛的作用,如有效成分人参皂甙Rg3等已在抗肿瘤临床中得到大量应用。但由于人参价格昂贵、病虫害严重等现状对人参的长远发展和应用推广带来一定的阻碍。内生菌被认为是一类开发潜力巨大的生物资源,其所产生的次生代谢产物中,部分甚至具有宿主植物相同或相近的代谢产物。因此,深入研究人参内生菌及其次生代谢产物可能成为解决人参发展现状的一条捷径和手段。大量研究报道证实部分人参内生菌具有抗肿瘤活性。秦建春等人研究发现人参内生球毛壳菌株RSQMK-9的次生代谢产物5’-epichaetovirdin A具有抗肿瘤活性。田义新等人发现两种人参内生真菌——GS-4和GS-22的乙酸乙酯粗提物对人宫颈癌Hela细胞具有抑制作用,IC50达到60-140ug/ml,这两种真菌分别属于半裸镰刀菌和半球菌。秦路平等人发现五种人参内生菌对胃癌、肠癌、肝癌等细胞具有较好的体外抑制能力。这些研究说明人参内生菌次生代谢产物在抗肿瘤天然产物开发和应用领域具有巨大的潜力和空间近年来,大量研究显示人参具有抗肿瘤效果,其活性成分主要集中于人参皂苷类物质中。因此,人参内生菌被认为是缓解人参短缺现状、扩大人参应用范围的重要途径。

2. 研究内容和预期目标

主要研究内容:

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3. 研究的方法与步骤

1、人参内生菌的分离;

随机选取人参的根、茎、叶,清水洗净,切成1 cm左右小段。70%乙醇浸泡30 s,无菌水洗涤1次,3% naclo浸泡消毒,根、茎、叶消毒时间分别为4、3、1 min,无菌水洗涤3次。无菌条件下,将材料剪成0.2 cm小段,置于pda培养基上,25℃黑暗培养。待植物材料长出真菌菌丝,挑取菌丝先端接种至pda培养基上,25 ℃黑暗培养6~7 d,根据内生真菌的菌落形态和显微形态特征,对内生真菌进行纯化。

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4. 参考文献

  1. 徐丽莉, 韩婷, 李琳,等. 人参内生真菌的分离及其体外抗真菌、抗肿瘤活性[j]. 第二军医大学学报, 2009,30(6):699-702.

  2. 徐丽莉. 人参内生真菌及其次生代谢产物研究[d]. 第二军医大学, 2009.

  3. 徐丽莉. 人参内生真菌及其次生代谢产物研究[d]. 第二军医大学, 2009.

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    5. 计划与进度安排

    2022-2022-1学期第17-20周-2022-2022-2学期第1-4周(2022.11.25-2022.03.31)查阅文献,完成开题报告的撰写。

    第5-6周(2022.04.01-2022.04.15)培养人参内生菌;

    第7-8周(2022.04.16-2022.04.29)使用多种培养基,进行单菌落分离;

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