1. 研究目的与意义
研究背景：
ta系统（toxin-antitoxin systems, ta systems）是普遍存在细菌质、粒染色体及古细菌基因组中的很小的遗传模块，我们对它的中文名字仅仅是从字面上翻译的来的～毒素-抗毒素系统。普遍的观点是毒素是与细菌致病有关的有毒物质，抗毒素则是细菌毒素刺激机体后产生的免疫球蛋白。然而，该系统与传统的毒素与抗毒素并无关联。最早在大肠埃希菌f质粒中发现存在ta系统，很长一段时间认为ta系统的作用就是维持质粒的稳定，并没有引起人们的重视。其分子机制是如果子代细胞丢失编码ta系统的基因，抗毒性分子就能被内源性atp依赖的蛋白激酶快速裂解，毒性蛋白得以释放，从而杀死丢失质粒的细胞，以至于只有拥有该质粒的细胞才能得以存活。因此这种机制被称为分离杀死后杀伤或质粒成瘾。然而，近几年发现ta系统除了存在于质粒之外，在细菌和古细菌的染色体上也普遍存在，且有多个拷贝，说明ta系统可能具有更重要更广泛的生物学作用。因此ta系统越来越受到微生物研究者的关注。
随着大规模测序细菌的基因组，发现ta系统广泛存在于染色体上。从抗毒素的性质以及对于毒素活性的调控方式，ta系统可分为5种类型。我们所研究的relb（抗毒素分子）是属于ta系统中的Π型，。
2. 研究内容和预期目标
研究内容：
本论文主要内容是对ta系统relb基因敲除后的研究。包括：
1.对relb基因所在dna片段进行pcr扩增后纯化回收。
3. 研究的方法与步骤
研究方法：
利用同源重组的方法对恶臭假单胞菌的relb基因进行敲除。
步骤包括：
4. 参考文献
[1] 丁克强, 骆永明. 多环芳烃污染土壤的生物修复[j]. 土壤, 2001, 33(4):169-178.
[2] 樊海平. 恶臭假单胞菌引起的欧洲鳗鲡烂鳃病[j]. 水产学报, 2001, 25(2):147-150.
[3] 李国利, 胡福泉. 毒性分子-抗毒性分子系统的生物学作用研究进展[j]. 微生物学杂志, 2015(1):101-104.
5. 计划与进度安排
1. 2.20—3.29查阅相关文献资料完成开题报告
2. 3.13—4.9设计实验方案，做好实验前准备，包括设计引物，购买相关的分子试剂盒，制备大肠杆菌感受态等。
3. 4.10—5.14 进行实验，包括pcr，酶切，连接，转化，挑阳性克隆，送测序，转化表达宿主，诱导，进行表达检测等。
