1. 研究目的与意义
产甲烷古菌属于古菌域的广古菌门,为严格的厌氧微生物。产甲烷古菌能够利用简单基质产甲烷。它们处于厌氧发酵过程中最后一个环节。在自然界碳素循环中扮演重要角色。研究产甲烷古菌,对生物质能的利用有重要的应用价值。本研究选择从不同厌氧生境中分离、鉴定产甲烷古菌,目的是丰富产甲烷古菌菌种资源,发现具有特殊性状的产甲烷古菌,为沼气微生物菌剂的研制打下基础。
产甲烷菌是一类极端厌氧古细菌,属古细菌门(euryarchaeota)。其主要存在于严格厌氧环境,如人类的消化系统和反刍动物的瘤胃、动物粪便、厌氧污泥和沼气反应器、湖泊或海底沉积物、深部油层和煤层等环境中均有分布。产甲烷菌参与有机物厌氧降解的最后一步,能量代谢的终产物主要为甲烷气体。通过产甲烷古菌的筛选,鉴定获得具优良性状的产甲烷古菌株,既能丰富产甲烷古菌菌种资源,为微生物菌剂的研制提供基础,还可为产甲烷古菌分子生物学和代谢机理的研究提供基本材料。为厌氧消化的调控技术的研究打下基础。
产甲烷菌是严格厌氧的微生物,在严格厌氧技术发明之前,产甲烷菌的分离培养研究进展缓慢。近年来,随着厌氧分离技术的改进,结合先进的鉴定手段和分析方法,更多种类的产甲烷菌菌株被鉴定出来。产甲烷菌种类繁多,传统上主要从它们的形态结构、生理生化特性和遗传性特性等特征进行分类。
2. 研究内容和预期目标
浓香型白酒发酵的主要工艺特点是糖质原料为底物、大曲为糖化剂和发酵剂,以泥窖为发酵容器的多菌种混合固态发酵。泥窖不仅是发酵容器,窖泥中还存在多种功能微生物,过去研究发现梭菌是主要的产酸功能微生物,而窖泥中甲烷菌的组成和功能尚未进行深入研究。对窖泥中甲烷菌的分离鉴定和生理生化研究有助于了解窖泥微生物群落形成的机理。
本论文的主要研究内容如下:
1、利用选择性培养条件分离单菌落;
3. 研究的方法与步骤
1.利用选择性培养基分离单菌落
(1)将上层隔氧培养基和下层选择性培养基分别配制后,加入微量元素母液1ml/l,115℃高温蒸汽灭菌20min。
(2)将下层选择性培养基在无菌操作台快速倒入平皿中,厚度大概在0.4-0.7cm左右,冷却凝固。
4. 参考文献
1刘艺. 甲烷菌分离纯化和产气效果研究[d]. 湖南农业大学, 2014.
2王彬, 邓功成, 苏小二. 厌氧消化器中甲烷古菌的分离与纯化[j]. 黔南民族师范学院学报, 2014, 34(5):112-116.
3王世全. 活性污泥中甲烷菌的研究[d]. 大连工业大学, 2014.
5. 计划与进度安排
1、2022年2月13日—2022年2月28日 接受任务,查阅和翻译文献,撰写及完成开题报告;
2、2022年3月1日—2022年4月1日 窖泥中甲烷菌厌氧富集、分离;
3、2022年4月2日—2022年4月20日分离菌株的液培,生长特征测量;
