人参内生菌分离及多样性分析开题报告

1. 研究目的与意义

人参属于五加科人参属，是传统名贵中药。人参在我国有2000多年的药用历史，其对中枢神经系统、心血管系统、消化系统、免疫系统、炎症、肿瘤等有广泛的作用，如有效成分人参皂甙Rg3等已在抗肿瘤临床中得到大量应用。人参对中枢神经系统具有兴奋作用，而大量时反而有抑制作用。能加强动物高级神经活动的兴奋和抑制过程。并能增强机体对一切非特异性刺激的适应能力，能减少疲劳感。人参对脑血流量和脑能量代谢亦有明显的影响。人参制剂可增加兔脑葡萄糖的摄取，同时减少乳酸、丙酮酸和乳酸/丙酮酸的比值，并可使葡萄糖的利用从无氧代谢途径转变为有氧代谢。人参亦可使大脑皮层中自由的无机磷增加25%。人参果皂甙能提高脑摄氧能力。总之，人参能使动物大脑更合理地利用能量物质葡萄糖，氧化产能，合成更多的ATP供学习记忆等活动之用。人参能增加肝脏代谢各物质的酶活性，使肝脏的解毒能力增强，从而增强机体对各种化学物质的耐受力。同时，它能增强组织呼吸，促进无氧糖酵解，在缺氧条件下提高产能，降低机体氧耗量，所以能保护神经元及心血管系统提高对缺氧的耐受能力。临床验证人参苷防治急性、慢性高原病有效。但是由于其产量低、虫害严重，导致人参严重供不应求。内生菌因其含有于宿主植物相似的次生代谢产物，因此人参内生菌成为破解人参现状的有效途径之一。近年来，大量研究显示部分人参内生菌具有抗肿瘤活性，近年来，大量研究显示部分人参内生菌具有抗肿瘤活性，更加突显人参内生菌得重要性和研究意义，这些研究说明人参内生菌次生代谢产物在抗肿瘤天然产物开发和应用领域具有巨大的潜力，更加突显人参内生菌得重要性和研究意义。因此，本论文研究人参内生细菌的多样性，筛选分离具有抗肿瘤活性的内生细菌。

2. 研究内容和预期目标

1． 购买野生型、栽培型人参，收集人参内生细菌，进行宏基因组测序，分析多样性；

2． 对上述人参进行内生细菌培养，筛选分离单克隆，对这些单克隆进行摇瓶培养；

3． 收集上述培养物，进行乙酸乙酯萃取，浓缩。在a549细胞上进行mtt检测，找寻具有抗肿瘤活性的人参内生细菌；

3. 研究的方法与步骤

研究方法、步骤：

1． 人参内生细菌多样性分析

1.1 购买原产自吉林、河南等地人参。确保吉林所购人参为野生型，河南所购人参为栽培型。

1.2 对上述所购人参进行切块、消毒等工作。

4. 参考文献

!--[if !supportlists]--1. 1!--[endif]--liu, k., et al., koninginins n-q, polyketides from the endophytic fungus trichoderma koningiopsis harbored in panax notoginseng. natural products and bioprospecting, 2016. 6(1): p. 49-55.

!--[if !supportlists]--2. 2赵俞,王琦. 人参内生菌的多样性及其次生代谢产物. 菌物研究, 2012(02): 113-118.

3姜云. 人参内生可培养细菌16s rdna-rflp分析. 东北林业大学学报, 2012. 40(8): 34-39.

5. 计划与进度安排

1、2022年2月22日—2022年3月10日 接受任务，查阅和翻译文献，撰写及完成开题报告；

2、2022年3月10日—2022年4月15日 人参内生菌收集，宏基因组测序；

3、2022年4月16日—2022年4月15日 人参内生细菌的分离筛选；