1. 研究目的与意义
Ubiquitin是广泛存在于真核细胞的热稳定多肽,由76个氨基酸残基组成。Ubiquitin在进化上显示出高度保守性。从酵母、植物到哺乳动物,仅有3个氨基酸残基不同。它在介导细胞内蛋白质降解、转录的调节以及应激反应中发挥重要作用。
它的主要功能是标记需要分解掉的蛋白质，使其被26S蛋白酶体降解。26S蛋白酶体上调节亚基上的一些受体可以识别K48和K11位连接的多聚泛素化蛋白，20S核心亚基在ATPase供能下水解底物。Ubiquitin也可以标记跨膜蛋白，参与蛋白质的膜泡运输。非典型泛素链在细胞信号传导，内吞，以及DNA损伤修复，调控NF-kB通路中起着重要作用。它在真核生物中具有高度保留性，人类和酵母的ubiquitin有96%的相似性。
2. 研究内容和预期目标
本实验属于分子生物学中的基因重组内容，实验包括目标基因的获取以及目标基因的扩增和重组表达，因此具体可以概括为以下几个方面的内容：
1.查找文献，确定酵母细胞中所要研究的蛋白序列；
2.根据蛋白序列和所需要的载体序列设计蛋白质的引物序列； 3.提取酵母基因组，利用酵母基因组进行目标序列的扩增； 4.纯化目标序列，将目标序列插入载体中； 5.将重组的质粒转入到大肠杆菌中进行表达。3. 研究的方法与步骤
一.酵母菌基因组的提取
4. 参考文献
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5. 计划与进度安排
本试验主要利用蛋白质重组技术将泛素蛋白ubiquitin基因插入到氨苄青霉素抗性的质粒中，然后对蛋白质进行体外表达并纯化的过程，因此本试验的内容主要包括一下几个方面： 目标基因的扩增，酶切 ；目标基因插入到载体中 ；目标基因的表达 ；目标蛋白的纯化 。
因此根据本试验的内容，我们安排一下实验进度：3月2号-3月30号 目标基因的扩增，酶切，插入及检验；4月1号-4月15号 目标基因的蛋白表达及检验；4月16号-4月30号 目标蛋白的纯化；5月1号-6月1日 数据整理及毕业论文的撰写。
