铅污染辣椒幼苗的生理生化特征开题报告

 2022-03-18 20:58:55

1. 研究目的与意义

铅是一种青灰色重金属。在加热到400-500℃时会有铅蒸汽逸出形成铅烟,在用铅锭制造铅粉和极板的过程中都会有铅尘散发,污染空气,当空气中铅烟尘达到一定浓度对人体是有害的。

辣椒,学名:capsicum annuum l.,茄科、辣椒属。为一年或有限多年生草本植物。果实通常呈圆锥形或长圆形,未成熟时呈绿色,成熟后变成鲜红色、绿色或紫色,以红色最为常见。辣椒的果实因果皮含有辣椒素而有辣味,能增进食欲。辣椒中维生素c的含量在蔬菜中居第一位,原产墨西哥,明朝末年传入中国。还有观赏椒,圆形,不可食用,颜色有红色、紫色等。

重金属污染严重影响植物的生长发育, 影响作物的产量和品质, 并通过生物链放大作用进一步对人类和环境造成严重危害, 因此重金属污染已成为世界性的重大环境问题。因而降低重金属在作物中的富集,减少重金属进入食物链已受到广泛的关注。

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2. 研究内容和预期目标

植物能通过根、茎、叶各组织吸收对土壤重金属污染进行修复,主要包括植物降解、萃滤、固定、吸收等方面 。而植物的根、茎和叶对Pb污染的吸收和积累能力则不尽相同,总的说来植物可将Pb滞留于根部,限制其向地上部运输,减少Pb对植物叶片的光合作用及其他重要生理生化过程的干扰和破坏。

本课题用一系列浓度梯度的铅离子对辣椒种子及幼苗进行处理,然后测定一下生理生化指标:辣椒幼苗根系活力,叶绿素含量,MDA含量,叶面积大小,辣椒种子发芽率等。以正常生长环境下辣椒幼苗的指标为对照,分析铅离子对辣椒幼苗的生理生化特征的影响。进一步预防铅污染对植物的影响。

3. 研究的方法与步骤

1.根系活力的测定

实验步骤:

①标准曲线的制作:配制0,0.04%,0.03%,0.02%,0.01%,0.005%的TTC溶液,各取5ml放入刻度试管中,各取5ml乙酸乙酯和少量Na2S2O4(2mg),充分震荡后产生红色的TTF,转移到乙酸乙酯层,待有色液层分离后,补充5ml乙酸乙酯,震荡后静置分层,取上层乙酸乙酯液,以空白作为对比,在分光光度计上于485nm处测定各溶液的OD,绘制标准曲线。

②TTC还原量的测定:称取根样品2g,浸没于盛有0.4%TTC和66mmol/L磷酸缓冲液(pH=7)的等量混合液10mL的烧杯中,37℃保温3h,加入1mol/L硫酸2mL终止反应。取出根,提取TTF,分光光度计测定OD。

③计算:TTC还原强度=TTC还原量(g)/根重(g) 时间(h)

④将结果记录于表中:

0mmol/LPb2

5 mmol/LPb2

10 mmol/LPb2

15 mmol/LPb2

1

2

3

1

2

3

1

2

3

1

2

3

1d

2d

3d

4d

⑤结果分析

2.叶绿素含量的测定

实验步骤:

①色素的提取:取叶片0.5g放入研钵中加纯丙酮5mL,少许CaCO3和石英砂,研磨成匀浆,再加80%丙酮5mL,离心,离心后弃沉淀,上清液用丙酮定容至20mL.

②测定OD值:取1mL提取液,加入丙酮4mL稀释后转入比色杯中,以80%丙酮为对照,分别测定663nm,645nm处的OD值

③计算

④将结果记录于表中:

0mmol/LPb2

5 mmol/LPb2

10 mmol/LPb2

15 mmol/LPb2

1

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3

1

2

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1

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1d

2d

3d

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⑤结果分析

3.MDA含量的测定

实验步骤:

①MDA的提取:取经过处理的叶片1g将其剪碎,加入10%三氯乙酸(TCA)2mL和少量石英砂,研磨,进一步加入8mLTCA充分研磨,匀浆液以4000离心10min,上清液即为样品提取液。

②显色反应及测定:吸取2mL提取液,加入2mL0.6%TBA液,混匀,在试管上加盖塞,置于沸水浴中沸煮15min,迅速冷却,离心。取上清液测定532nm和450nm处的OD值,对照管以2mL水代替提取液。

③根据公式计算:c=6.4510-6 A352-0.56 10-6 A450,再计算出每克样品中MDA的含量。

④将结果记录于表中:

0mmol/LPb2

5 mmol/LPb2

10 mmol/LPb2

15 mmol/LPb2

1

2

3

1

2

3

1

2

3

1

2

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1d

2d

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⑤结果分析

4.叶面积大小的的测定

叶片是植物接受光能的主要器官,其数量多少和空间分布情况,对个体和群体受光效率产生很大影响。叶面积是光合效率和呼吸效率的重要指标。测定作物叶面积指数的动态变化,有助于采取各种有效栽培措施,促进植物的正常生长发育。

印相重量测定法,在厚薄均匀的纸上(计算该纸的面积和称重重量),用铅笔描下叶片的形状,将纸上图形剪下称重,依据下列公式计算该叶片的面积。

叶面积=整张纸张面积*(剪下叶形纸重/整张纸重)

结果分析

4. 参考文献

[1] 赖晓英,贺稚非,吴丽红.辣椒的研究及开发现状[j].中国调味品,2006(03).

[2] 楼蔓藤,秦俊法,李增禧,李素媚,劳志华,陈伟民.中国铅污染的调查研究[j].广东微量元素科学,2012(10).

[3] 段德超,于明革,施积炎.植物对铅的吸收、转运、累积和解毒机制研究进展[j].应用生态学报2014,25(1): 287-296.

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5. 计划与进度安排

合理安排实验进度:

1. 2022-12-6 接受任务;

2. 2022-02-13 2022-03-9 完成开题准备;

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